Псориаз остается одной из актуальных проблем современной дерматологии. «Высокий удельный вес (до 15%) среди других поражений кожи, мультифакторность этиологии, хроническое рецидивирующее течение, недостаточная эффективность существующих средств терапии, неполная изученность механизмов развития» [1, с. 140] обусловливают необходимость дальнейшего исследования патогенеза заболевания и разработки методов лечения этого дерматоза.
«Важную роль в развитии псориаза играют дендритные клетки и активированные Т-лимфоциты, взаимодействие которых запускает ряд механизмов, приводящих в конечном итоге к развитию воспали- тельного процесса и формированию псориатических поражений кожи» [2, с 35]. Иммунологические исследования установили обусловленность псориаза функциональными и коммуникативными аномалиями Т-лимфоцитов. «Установленное гиперактивное состояние Т-хелперов при псориазе сегодня рассматривается в качестве главного механизма, приводящего к эпидермальной пролиферации с нарушением дифференцировки кератиноцитов, расширению сосудов, пролиферации и кумуляции нейтрофилов и Т-лимфоцитов. Активация Т-клеток является ключевым событием в каскаде взаимодействий клеток воспалительного инфильтрата, кровеносных сосудов и кератиноцитов» [3, с. 33].
Исследование особенности иммунного статуса у больных псориазом в зависимости от возраста, длительности псориаза и течения псориатической болезни по нашему мнению позволят дополнить современное представление о патогенезе данного заболевания.
При наблюдении изменений иммунитета мы изучали изменения показателей клеточного и гуморального иммунитета у 54 больных псориазом в зависимости от возраста больных, давности заболевания и частоты рецидивов.
Методы исследования. Показатели клеточного иммунитета включали определение содержания Т-, В-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-супрессоров, натуральных киллеров (NK-клеток с фенотипом CD16 + и CD56 +), цитокинов (ИФН-α, ИФН-γ, ИЛ-2 и ИЛ-4). Состояние гуморального звена иммунитета оценивали по уровню ЦИК. Также изучали количественное содержание в сыворотке крови иммуноглобулинов А, М, G. Для идентификации различных субпопуляций Т-лимфоцитов использовали ЛЦТ. Для определения общего количества лимфоцитов применяли коммерческие наборы МКАТ («МедБиоСпектр», РФ — Москва). Для определения уровня ЦИК использовали метод светового рассеивания вследствие преципитации комплексов антиген-антитело с последующим спектрофотометрическим определением оптической плотности преципитата. Определение содержания IgG, IgA, IgM в сыворотке крови осуществляли методом простой радиальной иммунодиффузии с использованием моноспецифических сывороток против иммуноглобулинов человека производства НИИ эпидемиологии и микробиологии (Россия, Нижний Новгород). Интерфероны изучали с помощью ИФА. Определение цитокинов проводили на иммуноферментном анализаторе фирмы «Sanofi Diagnostics Paster» PR 2100 (Франция). Концентрацию α-и γ-ИФН изучали с помощью тест-систем производства НПО «Диагностические системы» (РФ, Н. Новгород), а уровень ИЛ-2 и ИЛ-4 — с использованием наборов производства «Протеиновый контур» (РФ, СПб).
Результаты исследования. Исследование иммунитета в зависимости от возраста пациентов представлено в таблице 1.
Таблица 1
Показатели (М±m) иммунной системы больных псориазом в зависимости от возраста пациентов
| Показатель
|
Возраст пациентов |
Группа контроля, n=20 | ||
| 18-30 лет
n=8 |
31-50 лет
n=25 |
51 и старше
n=21 |
||
| СD3+лимфоциты, % | 55,4±1,3 | 51,7±1,31 | 49,0±2,3 1 | 59,7±1,3 |
| СD4+лимфоциты, % | 30,2±0,8 | 28,0±0,71 | 22,6±1,11 | 30,0±0,9 |
| СD8+лимфоциты, % | 17,0±0,7 | 17,4±1,51 | 23,1±1,7 1 | 16,6±0,5 |
| СD22+лимфоциты, % | 11,1±0,6 | 10,2±0,6 | 8,5±0,81 | 10,8±0,7 |
| СD16+лимфоциты, % | 16,2±0,8 | 14,2±0,8 1 | 13,2±0,8 1 | 16,9±2,30 |
| СD56+лимфоциты, % | 16,7±1,6 | 15,2±1,71 | 12,6±0,61 | 17,3±1,45 |
| ИФН-α, пг/мл | 5,38±0,6 | 4,3±0,7 1 | 3,28±0,4 1 | 5,74±1,1 |
| ИФН-γ, пг/мл | 81,8±2,9 | 51,2±1,5 1 | 31,8±1,9 1 | 82,4±7,9 |
| ИЛ-4, пг/мл | 28,2±3,71 | 34,6±5,21 | 58,2±4,71 | 22,7±3,4 |
| ИЛ-2, пг/мл | 25,6±2,41 | 17,8±1,81 | 15,7±1,41 | 28,3±2,6 |
| IgA, г/л
|
2,0±0,1 1 | 1,8±0,3 1 | 2,2±0,2 1 | 3,3±0,3 |
| IgM, г/л
|
1,5±0,05 | 1,4±1,2 | 1,7±0,41 | 1,4±0,2 |
| IgG, г/л
|
12,2±1,4 1 | 14,0±0,8 1 | 14,2±1,6 1 | 10,6±0,7 |
| ЦИК, усл.ед
|
61,2±2,8 | 86,5±4,3 1 | 94,2±10,6 1 | 56,2±5,0 |
Примечание. 1 – вероятная разница от аналогичного показателя здоровых доноров (р<0,05)
При исследовании иммунологических показателей в зависимости от возраста установлено отклонение в сторону снижения с увеличением возраста пациентов СD3 + на 18%, СD4 + на 25%, СD22 + на 21%, СD16 + на 22% и СD56 + лимфоцитов на 27% и увеличение СD8 + лимфоцитов на 39 %. Снижение ИЛ-2 на 45%, ИФН-α на 40% и ИФН-γ на 61%, а также увеличение содержания ИЛ-4 на 156%. Снижение содержания IgA, увеличение IgG и ЦИК.
Далее были проанализированы иммунологические показатели в зависимости от давности псориаза (таблица 2).
Таблица 2
Показатели (М±m) иммунной системы больных псориазом в зависимости от давности заболевания
| Показатель
|
Давность заболевания |
Группа контроля, n=20 | ||
| 1-5 лет
n=12 |
6-15 лет
n=20 |
16 и больше лет
n=22 |
||
| СD3+лимфоциты, % | 56,7±1,4 | 50,7±1,61 | 50,1±2,1 1 | 59,7±1,3 |
| СD4+лимфоциты, % | 29,6±0,8 | 26,1±0,71 | 23,1±1,11 | 30,0±0,9 |
| СD8+лимфоциты, % | 16,8±0,4 | 18,6±1,51 | 22,8±1,7 1 | 16,6±0,5 |
| СD22+лимфоциты, % | 10,4±0,6 | 10,0±0,6 | 8,2±0,81 | 10,8±0,7 |
| СD16+лимфоциты, % | 15,6±0,8 | 13,2±0,8 1 | 12,9±0,8 1 | 16,9±2,30 |
| СD56+лимфоциты, % | 16,9±1,6 | 14,2±1,71 | 12,8±0,61 | 17,3±1,45 |
| ИФН-α, пг/мл | 4,28±0,4 1 | 3,72±0,4 1 | 3,22±0,4 1 | 5,74±1,1 |
| ИФН-γ, пг/мл | 79,8±2,9 | 54,2±1,5 1 | 30,8±1,9 1 | 82,4±7,9 |
| ИЛ-4, пг/мл | 29,2±3,71 | 32,6±5,21 | 59,2±4,71 | 22,7±3,4 |
| ИЛ-2, пг/мл | 26,6±2,41 | 16,8±1,81 | 14,3±1,41 | 28,3±2,6 |
| IgA, г/л
|
2,1±0,1 1 | 1,9±0,3 1 | 1,9±0,2 1 | 3,3±0,3 |
| IgM, г/л
|
1,5±0,05 | 1,4±1,2 | 1,7±0,41 | 1,4±0,2 |
| IgG, г/л
|
11,2±1,4 | 14,5±0,8 1 | 16,1±1,6 1 | 10,6±0,7 |
| ЦИК, усл.ед
|
63,5±2,81 | 84,2±4,3 1 | 92,8±10,6 1 | 56,2±5,0 |
Примечание. 1 – вероятная разница от аналогичного показателя здоровых доноров (р<0,05)
Исследования в зависимости от продолжительности псориаза установило: достоверное снижение уровня СD3 + на 16%, СD4 + на 23%, СD16 + на 24% и СD56 + на 26% и увеличение СD8 + лимфоцитов на 37%, снижение ИЛ-2 на 49%, ИФН-α на 44% и ИФН-γ на 62%, а также увеличение содержания ИЛ-4 на 161% у больных псориазом с ростом продолжительности болезни более 15 лет.
Далее нами были проанализированы изменения показателей иммунитета в зависимости от частоты рецидивов (таблица 3).
Таблица 3
Показатели (М±m) иммунной системы больных псориазом в зависимости от частоты рецидивов псориаза
| Показатель
|
Частота рецидивов |
Группа контроля, n=20 | ||
| 1 раз в 3 года,
n=15 |
1 раз в 2 года,
n=14 |
ежегодно,
n=25 |
||
| СD3+лимфоциты, % | 53,4±1,31 | 51,7±1,31 | 52,1±2,3 1 | 59,7±1,3 |
| СD4+лимфоциты, % | 29,7±0,8 | 27,6±0,71 | 23,4±1,11 | 30,0±0,9 |
| СD8+лимфоциты, % | 16,8±0,7 | 18,6±1,51 | 22,6±1,7 1 | 16,6±0,5 |
| СD22+лимфоциты, % | 11,1±0,6 | 10,2±0,6 | 9,5±0,8 | 10,8±0,7 |
| СD16+лимфоциты, % | 15,2±0,8 1 | 14,6±0,8 1 | 12,9±0,8 1 | 16,9±2,30 |
| СD56+лимфоциты, % | 15,9±1,61 | 15,3±1,71 | 13,6±0,61 | 17,3±1,45 |
| ИФН-α, пг/мл | 4,8±0,61 | 4,3±0,7 1 | 3,28±0,4 1 | 5,74±1,1 |
| ИФН-γ, пг/мл | 71,8±2,91 | 45,2±1,5 1 | 34,3±1,9 1 | 82,4±7,9 |
| ИЛ-4, пг/мл | 30,2±3,71 | 32,6±5,21 | 56,2±4,71 | 22,7±3,4 |
| ИЛ-2, пг/мл | 21,6±2,41 | 18,8±1,81 | 16,7±1,41 | 28,3±2,6 |
| IgA, г/л | 1,9±0,1 1 | 2,1±0,3 1 | 1,8±0,2 1 | 3,3±0,3 |
| IgM, г/л | 1,5±0,05 | 1,4±1,2 | 1,7±0,41 | 1,4±0,2 |
| IgG, г/л | 13,4±1,4 1 | 14,1±0,81 | 15,2±1,6 1 | 10,6±0,7 |
| ЦИК, усл.ед | 69,2±5,8 | 84,3±4,3 1 | 91,2±5,6 1 | 56,2±5,0 |
Примечание. 1 – вероятная разница от аналогичного показателя здоровых доноров (р<0,05)
Исследование в зависимости от частоты рецидивов псориаза установило: снижение уровня СD3 + лимфоцитов на 13%, СD4 + на 22%, СD16 + на 23% и СD56 + лимфоцитов на 21% и увеличение СD8 + лимфоцитов на 36%, снижение уровня ИЛ-2 на 41 %, ИФН-α на 43%, ИФН-γ на 58%, а также повышение уровня ИЛ-4 на 147% у больных псориазом с ежегодными рецидивами.
Сопоставление иммунологических нарушений выявило, что снижение уровня CD3 +, CD4 +, CD22 +, CD16 + и CD56 +-лимфоцитов, увеличение CD8 + лимфоцитов, снижение ИФН-α, ИФН-γ, ИЛ-2, увеличение ИЛ-4, снижение IgA, увеличение IgМ и IgG и ЦИК наблюдали у больных со средним возрастом 52,4 ± 7,3 года, давностью псориаза 11,8 ± 2,1 года и рецидивами 1,2 ± 0,8 года. Дефицит Т-клеточного иммунитета, снижение СD22 + свидетельствует о частичном иммунодефиците в виде недостаточности клеточного звена иммунитета у больных псориазом.
На основании вышеперечисленного можно сделать вывод, что у больных псориазом наблюдалось нарушение иммунологического баланса, которое заключалось в угнетении клеточного звена иммунитета, установлено достоверное снижение относительного количества NK-клеток с фенотипом CD16 + и CD56 +. Также было выявлено достоверное снижение ИФН-γ, ИЛ-2 и ИФН-α, что косвенно свидетельствует об угнетении функциональной активности Т-хелперов 1 типа и истощение функциональных резервов всех иммунокомпетентных клеток. Выявлено повышение сывороточного содержания ИЛ-4, который является основным цитокином, синтезируемый Т-хелперами 2 типа. Наблюдалось увеличение IgG и ЦИК.
Список литературы:
- Гринюк С. М. Етіопатогенез псоріазу // Практична медицина. — 2008. — Том 14, № 2. — С. 140-147.
- Кубанова А. А. Иммунные механизмы псориаза. Новые стратегии биологической терапии // Вестник дерматологии и венерологии . — 2010. — N 1. — С.35-47.
- Охлопков В.А. Оценка состояния цитокинового профиля у больных псориазом на фоне иммуномодулирующей терапии // Вестник дерматологии и венерологии. — 2010. -N 4. — С. 33-39[schema type=»book» name=»ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ ПСОРИАЗОМ» description=»Цель. Определение некоторых показателей иммунитета у больных псориазом. Метод. Для идентификации различных субпопуляций Т-лимфоцитов использовали ЛЦТ. Для определения общего количества лимфоцитов применяли коммерческие наборы МКАТ («МедБиоСпектр», РФ — Москва). Для определения уровня ЦИК использовали спектрофотометрический метод. Определение содержания IgG, IgA, IgM в сыворотке крови осуществляли методом простой радиальной иммунодиффузии с использованием моноспецифических сывороток против иммуноглобулинов человека производства НИИ эпидемиологии и микробиологии (Россия, Нижний Новгород). Интерфероны изучали с помощью ИФА. Определение цитокинов проводили на иммуноферментном анализаторе фирмы «Sanofi Diagnostics Paster» PR 2100 (Франция). Концентрацию α-и γ-ИФН изучали с помощью тест-систем производства НПО «Диагностические системы» (РФ, Н. Новгород), а уровень ИЛ-2 и ИЛ-4 — с использованием наборов производства «Протеиновый контур» (РФ, СПб). Результат. При исследовании показателей клеточного звена иммунитета у больных псориазом мы установили достоверное снижение CD3 + и CD4 +-лимфоцитов у 85,2% больных. CD8 + лимфоциты были достоверно увеличены в 85,2% больных псориазом. Уровень натуральных киллеров CD16 + и CD56 + был достоверно уменьшен в 85,2% больных псориазом. При изучении цитокинов мы установили что уровень ИФН-α, ИФН-γ, и ИЛ-2 был достоверно уменьшен у всех больных псориазом. Выводы. У больных псориазом наблюдалось нарушение иммунологического баланса, которое заключалось в угнетении клеточного звена иммунитета, установлено достоверное снижение относительного количества NK-клеток с фенотипом CD16 + и CD56 +. Также было выявлено достоверное снижение ИФН-γ, ИЛ-2 и ИФН-α, что косвенно свидетельствует об угнетении функциональной активности Т-хелперов 1 типа, которые синтезируют ИЛ-2 и ИФН-γ, и истощение функциональных резервов всех иммунокомпетентных клеток. Выявлено повышение сывороточного содержания ИЛ-4, основного цитокина, синтезируемого Т-хелперами 2 типа. Наблюдалось увеличение IgG и ЦИК.» author=»Дащук Андрей Михайлович, Пустовая Наталья Александровна, Добржанская Евгения Игоревна» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-04-03″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_30.04.2015_04(13)» ebook=»yes» ]