Колоректальный рак занимает одно из лидирующих мест в структуре онкологической заболеваемости и смертности как в России, так и в западных странах. [6, с. 190]
По данным изученной нами литературы, несмотря на постоянное совершенствование методов оперативного вмешательства, полихимиотерапии, заболеваемость колоректальным раком за последние 50 лет в России (с 1960 по 2010 г.) возросла в 7 раз [1, с. 55] В связи с вышеуказанным, проблемы патогенеза и патогенетического обоснования новых объективных диагностических критериев стадийности распространения колоректального рака, в частности, аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки, а также оценки эффективности терапии заболевания остаются актуальными до настоящего момента.
К настоящему моменту достигнуты большие успехи в области изучения генетически обусловленных факторов развития онкопатологии. Одной из общепризнанных концепций канцерогенеза является активация протоонкогенов, подавление супрессирующей функции антионкогенов и выключение функциональной активности генов апоптоза в клетках различной морфофункциональной организации [5, с. 99].
В то же время отсутствуют данные литературы относительно характера, механизмов и особенностей системного действия неоплазий различных локализаций на организм. Так, остаются практически не изученными закономерности системных паранеопластических расстройств при раке ободочной кишки, в частности, аденокарциноме её восходящего отдела, что не используется в практической онкологии для оценки системного действия опухоли на организм на различных стадиях распространения опухолевого процесса.
В настоящее время является общепринятой TNM классификация развития злокачественных опухолей, отражающая размер, степень инвазии опухоли, заинтересованность регионарных лимфоузлов, наличие или отсутствие отдаленных метастазов [7, с. 304]. Несмотря на тот факт, что указанная классификация имеет высокую практическую значимость в диагностике стадийности распространения злокачественных новообразований, следует отметить определенный консерватизм принципов оценки опухолевого процесса, согласно TNM классификации, не позволяющий обнаружить характер системных, функциональных и метаболических сдвигов, сопутствующих той или иной стадии распространения опухолевого процесса.
Известно, что малигнизация клетки еще не означает развития онкологического заболевания. Малигнизированные клетки подвергаются элиминации при участии специфических механизмов защиты и неспецифических механизмов резистенции, динамические изменения которых не изучены на различных стадиях аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки. В то же время очевидно, что недостаточность указанных механизмов противоопухолевой защиты может быть обусловлена особенностями системного действия опухоли на организм, в частности, расстройствами гормонального, цитокинового, иммунного статусов.
Установление закономерностей системных паранеопластических расстройств на местно-распространенных стадиях злокачественных новообразований, в частности, аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки позволит не только значительно расширить современные представления о механизмах канцерогенеза, но и дополнит диагностические критерии системного действия опухоли на организм.
Цель. Установить закономерности системных паранеопластических расстройств на местно-распространенных стадиях развития аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки на основе закономерностей изменения показателей иммунного и цитокинового статусов, а также сформулировать новые диагностические критерии системного действия опухоли на организм при указанных стадиях заболевания.
Материал и методы исследования
В соответствии с поставленной целью проведена комплексная оценка метаболического и иммунного статусов у 26 онкологических больных с местно-распространенными (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0) стадиями аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки.
Все обследуемые пациенты пребывали на стационарном лечении в клинике хирургии и онкологии ФПК и ППС ГОУ ВПО Саратовского ГМУ им. В.И.Разумовского Минздрава России (на базе НУЗ «Дорожная клиническая больница на ст. Саратов II» ОАО «РЖД» в период с 2010 по 2014 гг.
Верификация диагноза производилась на основе традиционного комплекса клинико-лабораторного обследования онкологических больных, включающего: ирригоскопию, колоноскопию, ультразвуковое исследование брюшной полости, цитологическое и гистологическое исследования.
Группы исключения составили пациенты с сопутствующими или предшествующими онкологическими и аллергическими заболеваниями, эндокринопатиями, декомпенсированными формами висцеральной патологии.
У наблюдаемого контингента больных раком восходящего отдела ободочной кишки оценка субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8-Т-лимфоциты, CD19-В-лимфоциты, CD16-лимфоциты) периферической крови проводилась методом непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител производства «Медбиоспектр» (Москва). Исследование в крови иммуноглобулинов классов G, A, M проведено методом радиальной иммунодиффузии. Клеточный состав периферической крови оценивали на аппарате «Sysmex- K1000» и с помощью световой микроскопии.
Содержание цитокинов в сыворотке крови пациентов определяли однократно в момент поступления в стационар на иммуноферментном анализаторе «СтатФакс» (Москва), с использованием иммуно- ферментных тест систем, основанных на «сэндвич» — варианте твердофазного иммуноферментного анализа («Вектор-Бест», Новосибирск) в соответствии с инструкцией фирмы производителя ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург).
Математическую обработку полученных результатов проводили с использованием программы Statistica for Windows (версия 6.0) с помощью общепринятых методов статистического анализа, позволивших определить критерии достоверности Стьюдента, расчет средней арифметической. Достоверными считали различия при Р <0,05, Р< 0,01, Р< 0,001.
Результаты:
Как показали результаты исследований, развитие местно-распространенных стадий аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки проявлялось повышением общего содержания лейкоцитов периферической крови в сочетании с лимфопенией, моноцитопенией, ускорением СОЭ (табл. 1).
При этом, имело место изменение субпопуляционного состава лимфоцитов, проявляющееся снижением уровня в крови CD3, CD4, CD8, CD16. Одновременно обнаружено и падение уровня CD19 В-лимфоцитов, что приводило к снижению иммуноглобулинов G, A, M.
Как оказалось, развитие аденокарциномы ободочной кишки сочеталось усилением индуцибельного синтеза таких провоспалительных цитокинов как IL-1 и TNF альфа.
Касаясь биологической значимости обнаруженного нами дисбаланса субпопуляционного состава лимфоцитов следует отметить, что снижение уровня CD3 и CD4 свидетельствует о снижении хелперной активности Т-лимфоцитов, в то время как падение CD8— является одним из факторов снижения киллерной активности Т-системы лимфоцитов против трансформированных клеток, несущих чужеродную генетическую информацию. Обращает на себя внимание факт одновременного снижения CD16 и уровня Ig G, что безусловно свидетельствует об угнетении антителозависимой цитотоксичности натуральных киллеров.
Усиление индуцибельного синтеза Il-1 и TNF альфа безусловно не отражает специфического развития онкопатологии, однако в значительной мере может быть использовано в качестве в качестве динамических критериев стимуляции лимфоидной и моноцитарно-макрофагальной систем под влиянием антигенов, экспрессируемых на мембранах малигнизированных клеток.
Резюмируя выше сказанное следует заключить, что развитие стадий промоции и опухолевой прогрессии при аденокарциноме восходящего отдела ободочной кишки сочетается с недостаточностью механизмов элиминации малигнизированных клеток, обеспечиваемых за счет макрофагальной реакции и антителозависимого цитолиза при участии NK-клеток [4].
Таблица 1
Показатели клеточного состава периферической крови у больных аденокарциномой восходящего отдела ободочной кишки кишки на местно-распространенных стадиях развития неоплазии (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0)
|
Изучаемые показатели |
Контрольная группа |
Аденокарцинома восходящего отдела ободочной кишки (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0) |
|||
| n | M+m | n | M+m | P | |
| Общее число лейкоцитов (*109/л) | 25 | 6,3±0,17 | 26 | 14,6±0,61 | Р<0,001
|
| Абсолютное число лимфоцитов (*109/л) | 25 | 2,2±0,09 | 26 | 0,8±0,02 | Р<0,001
|
| Содержание
лимфоцитов (%) |
25 | 30,1±1,31 | 26 | 18,9±0,81 | Р<0,001
|
| СОЭ (мм/ч) | 25 | 9,3±0,21 | 26 | 28,2±1,11 | Р<0,001 |
Примечание
Р — рассчитано по отношению к соответствующим показателям группы контроля
Известно, что CD8–Т-лимфоциты обеспечивают лизис клеток, несущих чужеродную информацию, развитие «киллерного» удара, коллоидно-осмотического шока, а также продукцию лимфокинов – медиаторов клеточной гиперчувствительности [2, с.56]. Следовательно, при аденокарциноме восходящего отдела ободочной кишки в условиях недостатка CD8–Т-лимфоцитов подавляются указанные механизмы антицеллюлярной защиты организма от малигнизированных клеток. Дефицит CD4–Т-лимфоцитов на местно-распространенных стадиях аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки сопровождается нарушением вовлечения в иммунный процесс В-системы лимфоцитов, что проявлялось в уменьшении субпопуляции CD19 – клеток, а также уровня иммуноглобулинов классов G, A, M в крови (табл. 3).
Таблица 2
Показатели содержания в крови отдельных субпопуляций лимфоцитов у больных с аденокарциномой восходящего отдела ободочной на местно-распространенных стадиях развития неоплазии (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0)
| Изучаемые показатели | Контрольная группа | Аденокарцинома восходящего отдела ободочной кишки (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0) | |||
| n | M±m | N | M±m | P | |
| CD3 (%) | 25 | 62,8±3,03 | 26 | 32,4±1,52 | Р<0,001 |
| CD4 (%) | 25 | 41,4±1,88 | 26 | 17,1±0,55 | Р<0,001 |
| CD8 (%) | 25 | 21,4±0,71 | 26 | 15,3±0,46 | Р<0,001 |
| CD4/CD8 | 25 | 1,93±0,061 | 26 | 1,12±0,028 | Р<0,001 |
| CD16 (%) | 25 | 16,8±0,41 | 26 | 10,7±0,27 | Р<0,001 |
| CD19 (%) | 25 | 21,2±0,86 | 26 | 17,6±0,58 | Р<0,05 |
Примечание
Р — рассчитано по отношению к соответствующим показателям группы контроля
Относительно обнаруженного нами возрастания уровня IL-1 в крови, следует отметить, что указанный цитокин обладает способностью активизировать Т-клеточный ответ на антигены, индуцирует пролиферацию CD4 лимфоцитов, рост и дифференцировку В-клеток, усиливает продукцию IL-2 и колониестимулирующих факторов, инициирует процессы гемопоэза на уровне стволовых клеток. Однако биологческие эффекты IL-1 крайне противоречивы. Доказано, что указанный цитокин обладает протоонкогенным действием за счет подавления экспрессии на малигнизированных клетках -МНС II и тем самым препятствует развитию феномена «двойного» распознавания малигнизированных клеток CD4 Т-хелперами.
Таблица 3
Показатели уровня иммуноглобулинов G A M в крови у больных c аденокарциномой восходящего отдела ободочной кишки на местно-распространенных стадиях развития неоплазии (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0)
|
Изучаемые показатели |
Контрольная группа |
Аденокарцинома восходящего отдела ободочной кишки (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0) |
|||
| n | M±m | n | M±m | P | |
| IgG (г/л) | 25 | 14,43±0,58 | 26 | 13,15±0,17 | Р<0,05 |
| IgA (г/л) | 25 | 3,32±0,064 | 26 | 2,72±0,034 | Р<0,05 |
| IgM (г/л) | 25 | 1,81±0,084 | 26 | 1,56±0,069 | Р<0,05 |
Таблица 4
Показатели содержания интерлейкинов в крови у больных
аденокарциномой восходящего отдела ободочной кишки на местно-распространенных стадиях развития неоплазии (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0)
| Изучаемые показатели |
Контрольная группа |
Аденокарцинома восходящего отдела ободочной кишки (T3-4(а,в) N0M0, T3–4(а,в)N1-2M0) |
|||
| n | M±m | n | M±m | P | |
| IL-1
(пг/мл) |
25 | 17,2±0,73 | 26 | 22,7±1,02 | Р<0,001 |
| TNF-α (пг/мл) | 25 | 10,6±0,41 | 26 | 16,8±0,71 | Р<0,001 |
Примечание
Р — рассчитано по отношению к соответствующим показателям группы контроля
В соответствии с изученной нами литературой, следует отметить, что TNF-α – это группа провоспалительных цитокинов, объединённых в семейство фактора некроза опухоли, способных усиливать продукцию IL-1, IL-6, а также аутокринно индуцировать продукцию TNF-α и активировать антителообразование В-лимфоцитами. В то же время TNF-α-обладает высокой цитотоксичностью, вызывая геморрагический некроз опухоли. [3, с. 10].
Выводы:
- Одним из патогенетических факторов развития местно-распространенной формы аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки является недостаточность клеточного иммунитета, проявляющееся в виде моноцитопении, снижения уровня CD3,4 Т-лимфоцитов, CD8 Т- киллеров а также NK-клеток – CD16 лимфоцитов.
- Недостаточность клеточного звена иммунитета обнаруживает параллелизм с В-системой, на что указывает снижение уровня CD16 В-лимфоцитов и Ig G, A, M.
- Одной из закономерностей системного действия аденокарциномы восходящего отдела на организм является усиление индуцибельного синтеза
Il-1 и ТNF-альфа, обладающих локальным и системным прото- и антионкогенным действием.
Список литературы:
- Александров В.Б. Рак прямой кишки.- М., 2006
- Белоусова Е.А. Воспалительные заболевания толстой кишки как предраковые заболевания // Рос. журн. гастроэнтерол. гнпатол. Колопроктол.- 2002.- Т. 12, №4.- С. 56-62.
- Гарькавцева Р.Ф., Белов Н.Ф. Генетические аспекты рака толстой кишки // Новое в терапии колоректального рака/ Под ред. Н.И. Переводчиковой.- М., 2001.- С. 10-16.
- Канцерогенез: патофизиологические и клинические аспекты / Под общей ред. В.М. Попкова, Н.П. Чесноковой, В.Ю. Барсукова.- Саратов: Изд-во: СГМУ, 2011, 600 с.
- Копнин, Б.П. Современные представления о механизмах злокачественного роста / Б.П. Копнин // Материалы онкологического конгреса. – М.: Издательская группа РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, 2006-С. 99-102
- Состояние онкологической помощи населению России в 2008 г. / Под ред. В. И. Чиссова, В.В Старинского, Г.В. Петровой. — М., 2009.-190 с.
- TNM: Классификация злокачественных опухолей/ Под ред. Л.Х. Собина и др.; пер. с англ. И научн. Ред. А.И. Щёголев, Е.А. Дубова, К.А. Павлов. – М.: Логосфера, 2011.-304 с.[schema type=»book» name=»Диагностические критерии иммунного и цитокинового статусов на местно-распространенных стадиях аденокарциномы восходящего отдела ободочной кишки» author=»Агабеков Альберт Икрамбекович, Чеснокова Нина Павловна, Барсуков Владислав Юрьевич» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-04-25″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_ 28.03.2015_03(12)» ebook=»yes» ]