Актуальность исследования. Согласно результатам анализа обращений владельцев мелких непродуктивных животных за специализированной стоматологической помощью в УНТЦ «Ветеринарный госпиталь» было установлено, что 15% животных нуждаются в экстракции постоянных зубов в результате не выполнения ими своих функций в результате развития патологических процессов в ротовой полости, таких как заболевания пародонта, периостит, остеомиелит, разрушение зубов или их травмы, аномалии прикуса [2, c. 127]. Чтобы устранить негативные последствия утраты зуба, необходимо найти ему максимально равноценную замену, которой на сегодняшний день является имплантат.
Применение внутрикостных имплантатов позволяет добиться удовлетворительных или хороших анатомо-функциональных результатов решая многие вопросы как при частичной, так и при полной потере зубов, восстанавливая функцию приема корма и улучшая эстетические параметры животного [1, c. 12].
При зубной имплантации титан и его сплавы во многом соответствуют как химическим, так и механическим требованиям, а покрытия из наноструктурированного диоксида титана обладают более выраженными биоинтеграционными свойствами.
Изыскания способов ускоренной остеоинтеграции привели исследователей к мысли о возможностях применения различных покрытий на поверхности имплантируемых материалов [5, c. 368].
Исходя из этого мы определили направление работы – создать и дать обоснования применению имплантатов с термооксидированным покрытием модифицированных наноагрегатами флавоноидов для протезирования зубов у плотоядных животных.
В связи с чем предлагается использование для протезирования зубов у собак имплантатов, изготовленных с заранее заданными морфологическими параметрами. Данная методика будет учитывать анатомические и морфологические особенности строения зубочелюстной системы собак.
Материалы и методы исследования. Исследования проводились на базе УНТЦ «Ветеринарный госпиталь» ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ» им. Н.И. Вавилова (г. Саратов) и отдела клеточной инженерии Образовательно-научного института наноструктур и биосистем СГУ им. Н.Г. Чернышевского (г. Саратов).
Материалом послужили зубы, полученные от 5 собак породы такса, дермальные фибробласты человека, выделенные из здоровой донорской кожи, а также титановые заготовки имплантатов (n=50).
С целью выяснения закономерностей макроструктуры зубов использовались результаты количественного изучения (одонтометрические параметры) зубов. Основным инструментом, используемым в работе, являлся электронный штангенциркуль с заостренными ножками, позволяющий проводить измерения с точностью до 0,01 мм. Для проведения данного исследования использовались полные наборы зубов, извлеченных из одного черепа. Это необходимо для получения наиболее полного и правильного представления о соотношении формы и размеров зубов в пределах зубных рядов верхней и нижней челюстей [4, c. 368]. Извлечению зубов предшествовал этап приготовления мацерированных костей черепа с использованием соответствующих анатомических методик [7, c. 444].
Данные, полученные в ходе проведения измерений, анализировались с применением методов вариационной статистики. Определялись средние величины (М), среднее квадратичное отклонение (m). Для статистической обработки материала использовали компьютерную программу Microsoft Excel for Windows 7.
В ходе эксперимента на фибробластах определяли оптимальные дозировки компонентов композита, не оказывающие угнетающего влияния на данные клетки. Для получения клеточной культуры дермальных фибробластов использовали метод тканевых эксплантатов [3, c. 174].
В качестве субстрата для экспериментов использовали титановые заготовки диаметром 5 мм и высотой 2 мм с нанесенной на их поверхность полимерной плёнкой (полиазолидинаммоний, модифицированный гидрат-ионами галогенов) (ФВ) и прополисом в различных концентрациях (БАВ): образец №1 – контроль, образец №2 – БАВ 10мг/мл, образец №3 – БАВ 5 мг/мл, образец №4 – БАВ 2,5 мг/мл, образец №5 – БАВ 1,25 мг/мл, образец №6 – ФВ 1%, образец №7 – ФВ 0,1%, образец №8 – ФВ 0,01%, образец №9 – ФВ 0,001%, образец №10 – ФВ 0,0001%. Концентрация клеток составила 1*105 на образец. Жизнеспособность культуры составила 94%.
Показатели адгезии и пролиферации клеточной культуры на имплантатах изучали с помощью электронного микроскопа (MIRA\\LMU, “Tescan”).
Результаты исследования и выводы. Наиболее важными одонтометрическими параметрами являются высота зуба, высота (длина) корня (корней), высота коронки, вестибулярно-язычный и мезиально-дистальный размеры шейки зуба.
Полученные результаты представлены в таблице ниже на примере показателей зубов нижней челюсти справа собак породы «такса».
Таблица 1.
Одонтометрические параметры различных групп зубов (n=5, M±m) нижней челюсти справа собак породы такса.
| высота зуба,
мм |
длина
корня 1, мм |
длина корня 2,
мм |
высота
коронки, мм |
вестибурярно-язычный размер шейки, мм | мезиально-дистальный размер шейки, мм | |
| I 1 | 15,27±0,43 | 10,43±0,32 | — | 4,84±0,29 | 3,28±0,25 | 1,87±0,19 |
| I 2 | 17,00±0,36 | 10,88±0,21 | — | 6,11±0,22 | 3,72±0,11 | 2,03±0,06 |
| I 3 | 19,79±0,48 | 13,09±0,29 | — | 6,70±0,21 | 4,28±0,13 | 2,74±0,10 |
| C | 34,09±1,13 | 19,22±0,55 | — | 14,87±0,60 | 8,68±0,28 | 5,79±0,20 |
| P1 | 10,24±0,37 | 6,39±0,25 | — | 3,84±0,14 | 3,50±0,08 | 2,47±0,16 |
| P2 | 13,03±0,22 | 8,33±0,29 | 7,32±0,12 | 5,57±0,18 | 6,98±0,30 | 2,96±0,09 |
| P3 | 14,27±0,37 | 9,03±0,28 | 7,89±0,27 | 6,01±0,23 | 9,07±0,23 | 3,36±0,12 |
| P4 | 17,08±0,46 | 10,45±0,28 | 9,95±0,38 | 7,20±0,20 | 10,03±0,30 | 4,10±0,14 |
| M1 | 23,26±0,42 | 13,99±0,31 | 11,76±0,35 | 10,97±0,19 | 17,96±0,36 | 5,91±0,21 |
| M2 | 10,92±0,66 | 7,48±0,24 | 7,62±0,26 | 5,49±0,18 | 7,49±0,10 | 3,91±0,28 |
| М3 | 8,67±0,15 | 5,82±0,09 | — | 2,85±0,07 | 3,97±0,17 | 2,78±0,09 |
Обозначения. I- резец, C — клык, P — премоляр, M — моляр.
Проведенные исследования биосовместимости показали, что клетки хорошо адгезировали на образцах под номерами 1,2,3,4,5. Также вблизи представленных образцов наблюдалась высокая пролиферативная активность.
На образцах 6 и 7 наблюдалось угнетение роста клеток, а затем и их последующая гибель. Об этом свидетельствует изменение формы (округление) и отсутствие роста клеток.
На образцах 8, 9, 10, где концентрация полимера последовательно уменьшалась, наблюдалось улучшение адгезивной и пролиферативной способностей клеточной культуры. О чем свидетельствует наличие вблизи образца клеток характерной формы.
Наилучшие результаты получены на образце №10. При проведении контрольной микроскопии через 24 часа отметили, что культура в хорошем состоянии, форма клеток преимущественно веретеновидная, отростки выражены, ядра отчетливо контурируют [4, c. 188].
Таким образом, полученные одонтометрические параметры позволят осуществить оптимальное конструирование зубных рядов при протезировании благодаря определению формы и размера имплантатов. Для формирования нетоксичного биодеградируемого покрытия на поверхности имплантационных материалов необходимо использовать следующие концентрации веществ: прополиса — 1,25 мг в мл по ДВ, полимера – не более 0,0001 %.
ЛИТЕРАТУРА:
- Красников, А.В. Обоснование применения имплантатов из наноструктурированного диоксида титана, модифицированного наноагрегатами флавоноидов для протезирования зубов у собак [Текст] / А.В. Красников, В.В. Анников, Кудинов А.В. // Вестник Саратовского госагроуниверситета им. Н.И. Вавилова. — 2013. — №08. С.11-15.
- Морозова, Д.Д. Стоматологические болезни у домашних животных в г. Саратове [Текст] / Д.Д Морозова, А.В Красников // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. — 2014. — Т. 217. С.127-131.
- Пинаев, Г.П. Методы культивирования клеток // Культивирование клеток кожи человека. – СПб.: Изд-во Политехнического университета, 2008. – С.174-188.
- Самусев Р.П., Дмитриенко С.В., Краюшкин А.И. Основы клинической морфологии зубов. − Москва, 2002. −368 с.
- Шехтер, А.Б. Биосовместимость / под ред. В.И. Севастьянова. — М.: ГУП «Информационный центр ВНИИ геосистем», 1999. — 368 с.
- Шехтер, А.Б. Воспаление и регенерация // Воспаление. — М.: Медицина, 1995. — С. 200 — 219.
- Ярославцев Б. М. Анатомическая техника: руководство по изготовлению анатомических и биологических препаратов. – Фрунзе, Киргиз. гос. ун-та, 1961. – 444 с.[schema type=»book» name=»ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СОВМЕСТИМОСТИ КОМПОНЕНТОВ БИОДЕГРАДИРУЕМОГО ПОКРЫТИЯ ДЛЯ ИМПЛАНТАТОВ» author=»Красников Александр Владимирович, Анников Вячеслав Васильевич, Морозова Дарья Дмитриевна» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-06-01″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_ 30.12.2014_12(09)» ebook=»yes» ]