В клинической практике наиболее часто врач вынужден назначать антибактериальный препарат эмпирически, до уточнения этиологии заболевания. Однако данные литературы указывают на значительные трудности при эмпирическом выборе адекватной антибактериальной терапии при инфекциях, вызванных, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli или Klebsiella pneumoniae [1,2].
Наблюдаемое в последние десятилетия существенное расширение круга микроорганизмов, вызывающих инфекционные заболевания у человека, пополнение этого круга за счет считавшихся ранее безвредными микроорганизмами, выраженная устойчивость современных возбудителей к антибиотикам — все это свидетельствует об актуальности проблемы и необходимости изучения этиологии заболеваний и определить чувствительность к антибиотикам [3,4,5,6,7].
Цель нашего исследования является определить сравнительную чувствительность к тест — антибиотикам культур микроорганизмов выделенных от новорожденных и матерей.
Материалы и методы. МПК определяли по чувствительности культур микроорганизмов к антимикробным препаратам (АМП) методом серийных разведений антибиотиков в плотной питательной среде.
Сравнительную чувствительность культур микроорганизмов оценивали количественно по величине МПК/МИК (минимальная подавляющая/ингибирующая концентрация), выраженную в мкг/мл.
В работе использовали 149 штаммов микроорганизмов, выделенных из различных биотопов новорожденных
(1, 3, 5 сутки послеродового периода) и матерей (кишечник, кожа и слизистые оболочки). Все культуры микроорганизмов идентифицированы по культуральным, морфологическим, тинкториальным, ферментативно-биохимическим и антигенным свойствам. В соответствии с общепринятыми рекомендациями и определителем бактерий Берджи, 8-9 изданий – 1984, 1997гг. видовой спектр микроорганизмов был представлен: Escherichia coli — 29 штаммов (14 от новорожденных и 15 от матерей), Enterobacter sp.- 12 (7/5), Citrobacter sp. — 10 (4/6), Proteus spp. — 16 (7/9), Serratia marcescens — 4 (2/2), Klebsiella pneumoniae — 12 (7/5), Pseudomonas aeruginosa — 10 (4/6), Staphylococcus sp. — 23 (11/12), Enterococcus faecalis — 21 (9/12), Bacillus sp. — 12 (7/5), ВСЕГО — 149 (72/77).
Так как исследования проводились одномоментно, то штаммы сохранялись в полужидком агаре под слоем минерального масла в бытовом холодильнике в виде авторской коллекции. Перед исследованием штаммы
микроорганизмов, взятые из сохраняющей питательной среды, дважды субкультивировали на соответствующих для каждой таксономической группы бактерий питательных средах.
Для лабораторных исследований использовали 18 часовую агаровую культуру микроорганизмов, разведённую в стерильном физиологическом растворе, стандартизованную по стандарту 0,5 по Мак Фарланду и дополнительно разведенную в 10 раз стерильным физиологическим раствором до концентрации 107 микробных тел /мл.
Для исследования было использовано 3 АМП цефалоспоринового ряда I и III поколения: цефазолин, цефотаксим, цефтриаксон.
Антибиотики растворяли в стерильной дистиллированной воде рН 7,2-7,4 и готовили серию последовательных разведений, состоящую из 12 рядов в диапазоне конечных концентраций в агаре от 32 мкг/мл до 0,015 мкг/мл. Концентрации антибиотиков подобраны в соответствии с общепринятыми рекомендациями и терапевтической дозой АМП (на основании «Инструкции – аннотации» по препарату). Взвеси испытуемых штаммов микроорганизмов наносили на поверхность пластинчатого питательного агара с антибиотиком по 0,002-0,003 мл калиброванной бактериологической петлей.
Всего было сделано: разведений антибиотиков цефазолин, цефотаксим, цефтриаксон, разлито чашеки Петри с питательной средой, на которые было осуществлено посев культур микроорганизмов.
Полученные результаты по сравнительному лабораторному исследованию МПК культур микроорганизмов, выделенных от матерей и новорожденных представлены в таблице 1.
таблица№1
Сравнительная чувствительность к тест- антибиотикам культур
микроорганизмов, выделенных от новорожденных и матерей по количественному показателю — минимальная подавляющая концентрация — МПК, (М ± m, в мкг/ мл)
|
№№ № |
Группы
микроорганизмов |
Кол — во
штаммов° |
цефазолин | цефотаксим | цефтриаксон | |||
| Ново-
рожденные |
матери | Ново-
рожденные |
матери | Ново-
рожденные |
матери | |||
| 11 | Escherichia coli | 29 (14/15) | 7,03± 1,88 | 11,23± 1,88* | 0,09 ± 0,01 | 0,09± 0,01 | 0,19 ± 0,12 | 0,39± 0,09* |
| 22 | Enterobacter sp. | 12 (7/5) | 3,12± 1,0 | 6,25± 1,0* | 0,39 ± 0,12 | 0,89± 0,11* | 0,19± 0,06 | 0,49± 0,06* |
| 23 | Citrobacter sp. | 10 (4/6) | >200,0 | >200,0 | 0,39± 0,10 | 0,89± 0,11* | 0,19± 0,06 | 0,39± 0,09* |
| 44 | Proteus spp. | 16 (7/9) | 112,7 ± 4,25 | >200,0* | 1,04 ± 0,27 | 2,3 ± 0,27 | 1,56 ± 0,00 | 6,56± 0,16* |
| 5
5 |
Serratia marcescens | 4 (2/2) | >200,0 | >200,0 | 100,0± 0,0 | 25,0± 0,0* | 12,5± 2,4 | 25,0± 4,6* |
| 6
6 |
Klebsiella pneumoniae | 12 (7/5) | >200,0 | >200,0 | 100,0± 0,0 | 100,0± 0,0 | >200,0 | >200,0 |
| 7
7 |
Pseudomonas aeruginosa | 10 (4/6) | >200,0 | >200,0 | 100,0± 0,0 | >200,0 | >200,0 | >200,0 |
| 88 | Staphylococcus sp. | 23 (11/12) | 0,42 ± 0,2 | 0,45 ± 0,20 | 4,73 ± 1,02 | 1,09± 0,93* | 9,4 ± 3,21 | 9,4± 3,21 |
| 9
9 |
Enterococcus faecalis | 21 (9/12) | 12,5± 2,6 | 25,0± 4,6* | >200,0 | >200,0 | 50,0 ± 0,78 | >200,0* |
| 110 | Bacillus sp. | 12 (7/5) | 12,5± 4,6 | 25,0± 4,6* | 12,5± 2,4 | 22,5± 2,4* | 12,5± 3,4 | 12,5± 3,4 |
| ВСЕГО | 149 (72/77) | |||||||
Примечание: ° — количество штаммов – Всего (от новорожденных / от матерей);
* — достоверностей различий новорожденные / матери – p < 0,05
Вывод. Таким образом, проведенные исследования позволили установить, что цефалоспорины I поколения оказывают выраженное действие в опытах in vitro предпочтительно на грамположительные кокки.
В свою очередь цефалоспорины III поколения оказывают выраженное действие в опытах in vitro предпочтительно на грамотрицательные энтеробактерии. К Цефалоспоринам резистентны Ps. aeruginosae, Klebsiella pneumoniae.
(МПК > 200 мкг/мл). Внутривидовые штаммовые различия в МПК чувствительных к цефалоспоринам микроорганизмов могут различаться в 2-8 раз, но оставаться в пределах антимикробной эффективности.
Список литературы:
- Баженов Л.Г.Проблемы преодоления антибиотикорезистентности микроорганизмов // Инфекция, иммунитет и фармакология. – 2000. – №3. – С.11-12.
- Мусина Л.Т., Семина Н.А., Гладкова К.К. Микробиологический мониторинг за внутрибольничными гнойно-септическими инфекциями у новорожденных и родительниц //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. – 1996. — №2. – С.91-94.
- Прилепская B.H. Особенности инфекционных процессов нижнего отдела половых путей. Возможности терапии препаратами для локального применения. Гинекология 2000; 2(2): 57-9.
- Редько С.В. Современные особенности этиологической структуры гнойно-септических инфекций новорожденных. // Актуал. вопр. инфекц. патол. и вакцинопроф. у детей. Матер. IV Российского конгресса детских инфекц. — Москва, 2005. — С. 153-154.
- Редько С.В. Современные особенности этиологической структуры гнойно-септических инфекций новорожденных. // Актуал. вопр. инфекц. патол. и вакцинопроф. у детей. Матер. IV Российского конгресса детских инфекц. — Москва, 2005. — С. 153-154.
- Эшчанова Ф.Р. Частота носоглоточного носительства S.aureus среди персонала лечебно-профилактических учреждений хирургического профиля//Материалы конференции молодых ученых: Сб. тез. – Ташкент, 2008. – С.106-107.
- 7. Evans A., Mattern K.L. The bacterial flora of the anticubital fossa: the efficacy of alcohol disinfection at this site, the palm and the forhead. – Journal of Investigative Dermatology, 1980, 75, 45[schema type=»book» name=»Сравнительная чувствительность к тест-антибиотикам культур микроорганизмов выделенных от новорожденных и матерей» author=»Сейтханова Бибигул, Долтаева Бибигуль, Ескерова Сара, Ергебекова Гульмира» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-04-26″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_ 28.03.2015_03(12)» ebook=»yes» ]