Введение
Ишемия головного мозга, в частности инсульт, является наиболее распространенной патологией и занимает лидирующее положение в структуре смертности населения в России. Прогрессирующее течение хронической ишемии головного мозга закономерно приводит к ухудшению качества жизни и социальной дезадаптации больных, предшествует развитию ишемических инсультов [4]. Многофакторный и сложный патогенез хронической ишемии головного мозга диктует необходимость комплексной нейропротективной терапии. Однако использование ряда синтетических препаратов нередко сопровождается развитием побочных явлений. Целесообразным считается применение растительных средств, характеризующихся, как известно, широким спектром фармакологических свойств и безопасностью [5, 6].
Целью исследования явилось определение нейропротективной, нейромодулирующей активности комплексного растительного средства при ишемии головного мозга у крыс.
Материал и методы исследования
Растительное средство было получено из корней и корневищ Astragalus membranaceus, Scutellarius baicalensis и Phlojodicarpus sibiricus путем экстракции спирто-водным раствором и высушивания в вакуум-сушильном шкафу. Готовый экстракт представлял собой порошок светло-коричневого цвета, перед использованием его разводили дистиллированной водой.
Эксперименты проводили на крысах линии Wistar обоего пола с массой 180-200 г в соответствии с правилами, принятыми «Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» (Страсбург, 1986 г), приказом МЗ РФ № 267 «Об утверждении правил лабораторной практики» (19.06.2003 г).
Эксперименты проводили в двух сериях. В первой серии опытов ишемию головного мозга у крыс вызывали путем одномоментной окклюзии обеих общих сонных артерий под легким эфирным наркозом. Животным первой группы перед операцией вводили внутрибрюшинно физиологический раствор. Крысам 2-4 групп вводили экстракт внутрибрюшинно в дозах 50, 100 и 200 мг/кг массы за 10 минут до перевязки сосудов. Церебропротекторную активность экстракта у животных оценивали по неврологическому дефициту и выживаемости в течение 24 часов [1, 9]. Во второй серии опытов ишемию головного мозга у крыс воспроизводили путем окклюзии левой общей сонной артерии. Животные были распределены на 3 группы. Первую и вторую группы составили соответственно крысы с унилатеральной окклюзией сонной артерией и ложнооперированные животные. Третью группу составили крысы с унилатеральной окклюзией сонной артерией, получавшие экстракт в дозе 100 мг/кг в течение 7 дней до операции и 7 дней после нее. Крысы 1-2 групп получали дистиллированную воду по аналогичной схеме. На 7-8 сутки после операции проводили тестирование поведения животных в установках «Открытое поле» и «Крестообразный приподнятый лабиринт» (КПЛ) [3].
Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием t-критерия Стьюдента.
Результаты исследований
В первой серии опытов через 1-3 часа после операции в контрольной группе наблюдали у 20% крыс тонико-клонические судороги с последующим развитием комы. У остальных животных, за первые 4 часа наблюдений, отмечали быстрый прогресс очаговой (птоз, парез конечностей) и общей неврологической симптоматики (снижение двигательной активности, тонуса мышц и реакций на тактильные и болевые раздражители). К концу эксперимента показатель неврологического дефицита в контрольной группе составил 8,6, а выживаемости – 20% (таблица 1).
Введение животным экстракта в дозе 50 мг/кг оказывало умеренное влияние на их состояние: неврологический дефицит был меньше контроля на 21%, а выживаемость составила 37% (табл. 1). Введение экстракта в дозах 100, 200 мг/кг оказывало защитное действие: неврологический дефицит был меньше контрольных показателей соответственно на 34 и 46% (р≤0,05). Неврологические нарушения у животных в большинстве случаев выражались в замедленной реакции на внешние раздражители, малоподвижности. Грубые неврологические признаки (птоз, гемипарез), коматозное состояние регистрировали реже по сравнению с контролем. Выживаемость животных через 24 часа составила соответственно 62 и 64%. Защитный эффект экстракта, вероятно, обусловлен ингибированием развития глутамат-кальциевых реакций, о чем свидетельствовало отсутствие судорожных реакций и меньший неврологический дефицит у опытных крыс.
Во второй серии экспериментов у крыс опытной группы показатели горизонтальной и вертикальной активности в тесте «Открытое поле» были в 3,2 и 1,9 раз (p≤0,05) выше контрольных значений, а количество дефекационных болюсов в 2 раза (p≤0,05) ниже по сравнению с контролем (табл. 2). В КПЛ количество выходов опытных крыс в открытые рукава было выше контрольных показателей в 2,5 раза (р≤0,05) (табл. 3), общее время пребывания их в открытых рукавах было в 1,6 раз больше чем в контроле и сопоставимы с таковыми показателями ложнооперированных животных.
Унилатеральная окклюзия общей сонной артерии приводит к когнитивно-эмоциональным изменениям у крыс, о чем свидетельствуют результаты эксперимента. Вероятной причиной расстройств является развитие нейромедиаторного дисбаланса при ишемии головного мозга. Введение экстракта ограничивало развитие когнитивно-эмоциональных расстройств при недостаточности мозгового кровообращения. Защитный эффект испытуемого экстракта, обусловлен нейромодулирующим противоглутаматным и нейропротективным действиями Astragalus membranaceus, Scutellaria baicalensis Phlojodicarpus sibiricus при ишемии головного мозга [2, 7, 8, 10].
Таким образом, экстракт при окклюзии сонных артерий проявляет нейромодулирующий эффект, который обеспечивается действиями составляющих его компонентов.
Таблица 1
Влияние экстракта на неврологический дефицит и выживаемость крыс при окклюзии общих сонных артерий через 24 часа
| Группа животных | Неврологический дефицит (балл) | Выживаемость, в % |
| Контроль, (n=10) | 8,6±0,9 | 20 |
| Экстракт 50 мг/кг (n=8)
Экстракт 100 мг/кг (n=8) Экстракт 200 мг/кг (n=11) |
6,8±1,4
5,6±1,7 4,6±1,5* |
37
62 64 |
Примечание: * — означает, что здесь и далее различия значимы по сравнению с контролем при р≤0,05.
Таблица 2
Влияние экстракта на исследовательскую активность животных в «Открытом поле» на 7 сутки при унилатеральной окклюзии сонной артерии (n=10)
| №
|
Группа
|
Горизонтальн. активность | Вертикальн. активность | Дефекация |
| 1 | Контроль | 15,3±0,8 | 6,2±1,3 | 3,7±1,3 |
| 2 | Ложнооперированные | 56,0±4,9* | 10,2±2,2 | 2,8±0,8 |
| 3 | Экстракт 100 мг/кг | 49,0±6,8* | 12,1±1,6* | 1,8±0,3* |
Таблица 3
Влияние экстракта на поведение животных в крестообразном приподнятом лабиринте на 8 сутки при унилатеральной окклюзии сонной артерии
| №
|
Группа
|
Количество выходов в открытые рукава | Время, проведенное в открытых рукавах (сек). | Время, проведенное в закрытых рукавах (сек.) |
| 1 | Контроль | 1,0±0,2 | 15,5±8,3 | 167,8±6,4 |
| 2 | Ложнооперир. | 2,8±0,7 | 20,7±0,9 | 161,0±9,1 |
| 3 | Экстракт 100 мг/кг | 2,5±0,2* | 24,6±1,4 | 155,8±11,9 |
Литература
- Ахапкина В.И., Воронина Т.А. Изучение противоинсультного действия фенотропила на модели геморрагического инсульта (интрацеребральная посттравматическая гематома) у крыс // Атмосфера. Нервные болезни: журнал для практических врачей. – 2006, №1. — С.37-42.
- Батоцыренова Э.Т., Балдандоржиева М.В., Шантанова Л.Н., Гуляев С.М.Психотропный и антигипоксический эффекты астрагала перепончатого// Журнал научных статей «Здоровье и образование в XXI веке». – 2011, №1. Т.13. — С.109-111.
- Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. М, 1991. — 399с.
- Гусев Е.И., Скворцова В. Ишемия головного мозга. М., 2001. — 328с.
- Носаль М.А., Носаль И.М. Лекарственные растения и способы их применения в народе. – Киев, 1960. — 256 с.
- Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. Руководство для врачей. 2000. — 976с.
- Урбанова Е.З., Гуляев С.М., Николаев С.М. Нейрофармакологические эффекты Phlojodicarpus sibiricus (Steph. ex Spreng) K.-Pol.// Вестник Бурятского государственного университета. – 2013, №12. — С.125-128.
- Гуляев С.М. Защитное действие Phlojodicarpus sibiricus при ишемии головного мозга у крыс // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. — 2009. №3 (67). — С.172-174.
- Mc Grow. Experimental Cerebral infarction Effects of Pentobarbital in Mongolian Gerbils // Arch. Neurol. – 1977, 34. — P.334-336.
- Yu D., Duan Y., Bao Y., Wei C., An L. Isoflavonoids from Astragalus mongholicus protect PC12 cells from toxicity induced by l-glutamate// Journal of Ethnopharmacology. – 2005, № 98. — Р. 89–94.[schema type=»book» name=»НЕЙРОМОДУЛИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ РАСТИТЕЛЬНОГО ЭКСТРАКТА ПРИ ЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ИШЕМИИ » description=»Цель исследования: определение нейромодулирующей активности растительного экстракта при ишемии головного мозга у крыс. Методы исследования: ишемию головного мозга у крыс вызывали путем окклюзии обеих общих сонных артерий под наркозом. Нейропротективное действие экстракта оценивали по неврологическому дефициту и выживаемости крыс в течение 24 часов; влияние экстракта на функции ЦНС у крыс с унилатеральной окклюзией общей сонной артерией определяли с помощью методов «Открытое поле» и «Крестообразный приподнятый лабиринт». Результаты: введение животным экстракта уменьшает неврологический дефицит, повышает выживаемость после окклюзии обеих сонных артерий; ограничивает развитие поведенческих расстройств у крыс с унилатеральной окклюзией общей сонной артерии. Выводы: экстракт оказывает защитный эффект против ишемии головного мозга.» author=»Жалсанов Юрий Вениаминович, Гуляев Сергей Миронович, Николаев Сергей Матвеевич» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-01-05″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_30.11.16_31″ ebook=»yes» ]