Введение. Восстановление иммунологических нарушений – актуальная задача, так как большинство хронических, соматических, инфекционных болезней сопровождается вторичной иммунологической недостаточностью. Алгоритмизация иммунокоррекции (иммуномодуляции) предполагает использование фармакологических средств, которые способны увеличивать (иммуностимуляция) или снижать (иммуносупрессия) уровень иммунного ответа [1, с. 172].
На сегодняшний день иммуностимуляторы по классификации относятся к следующим группам: синтетические препараты; препараты бактериальной при [2, с. 42; 3 с. 62].
Растительный препарат представляет собой сочетание различных групп биологически активных веществ. В силу комплексности фитопрепарата, сложно выявить компонент, обуславливающий его фармакологическую активность [4, с. 74]. Поиск и изучение биологически активных соединений препаратов природного происхождения важны для понимания его механизма действия. Поэтому поиск эффективных и недорогих иммуностимуляторов, оказывающих при этом минимум побочных действий, является весьма актуально.
Целью настоящей работы являлось изучение хронической токсичности иммуностимулирующего препарата «Сапанокс-иммуно+».
Материалы и методы исследования. Крысам опытных групп вводили интраназально препараты: «Сапанокс-иммуно+» в дозах 6 мг/кг, 18 мг/кг, 54 мг/кг однократно в течение 5 дней [5, с. 277]. После процедуры введения препарата проводилось визуальное наблюдение за подопытными животными спустя 2, 4, 6 часов. Затем определенные группы крыс забивали на 6, 30 и 60 сутки после первого введения вещества и проводили забор периферической крови.
Животные находились под ежедневным наблюдением: отмечали потребление корма и воды, состояние волосяного покрова, слизистых оболочек и общее состояние (динамика массы тела, ректальная температура). Общее состояние оценивалось при ежедневном осмотре животных. Взвешивание, измерение ректальной температуры, потребления воды и корма выполнялось раз в неделю.
Для оценки гематологических показателей поводили Complete blood count — общий анализ крови на автоматическом гематологическом анализаторе Siemens ADVIA 2120 (Германия) в режиме CBC/5-DIFF. Кровь экспериментальных животных собирали в вакутейнер с К3ЭДТА, 10-кратно перемешивали для исключения образования микросгустков и доставляли в лабораторию.
Результаты исследований. Гематологические показатели крыс на фоне дозировки «Сапанокс-иммуно+» 6 мг/кг были представлены следующими значениями: общее число лейкоцитов в контроле составило 2,49±0,24 109 /л, и достигло максимального значения к 30 суткам 6,80±0,23 109 /л.
Общее число эритроцитов также статистически достоверно увеличивалось до 10,36±0,20 ×1012/л к 30 суткам, также к этому периоду экспериментального исследования статистически достоверно возрос уровень гемоглобина до 172,12±2,34 г/л и гематокрита до 54,75±2,32 %, что свидетельствует в пользу относительного эритроцитоза на фоне снижения объема циркулирующей крови. Среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитарной массе, другие расчетные коэффициента эритроцитов оставались в пределах физиологической нормы. На фоне введения препарата «Сапанокс-иммуно+» 6 мг/кг в течении всего периода времени статистически достоверно изменялось общее число тромбоцитов, так к 6 суткам показатель составил 837,80±39,82×109 /л, к 30 суткам — 595,80±39,82×109 /л и к 60 суткам возрос до 904,80±39,82×109 /л. Процентное содержание нейтрофилов с увеличением срока введения препарата статистически достоверно снижалось до 3,76±0,26 к 30 суткам эксперимента, и до 8,66±0,26 к 60 суткам, наряду с этим статистически достоверно увеличился уровень лимфоцитов до 25,74±0,50* % к 30 суткам и до 18,54±0,50% к 60 суткам в сравнении с контролем. Процентное содержание базофилов существенно не изменялось, но уровень эозинофилов к 60 суткам статистически достоверно возрос в 8 раз с 0,94±0,95 до 8,19±0,18 %, и в абсолютных значениях с 0,08±0,05 109 /л до 0,40±0,16 109 /л (Р≤0,001), что позволяет рекомендовать изучение аллергизирующих свойств у данного препарата.
По гематологическим показателям крыс на фоне дозировки «Сапанокс-иммуно+» 18 мг/кг демонстрируют наличие статистически достоверных изменениях как в показателях красной, так и белой крови. Общее число лейкоцитов достигло максимального значения на 6 сутки эксперимента — 13,64±0,23 ×109/л, а в дальнейшем постепенно снижалось до 10,78±0,23 к 30 суткам и до 5,39±0,23 к 60 суткам эксперимента.
По показателям красной крови отмечено статистически достоверный рост показателей уровня эритроцитов, гемоглобина, гематокрита. Так, общее число эритроцитов составило на 60 и 30 сутки — 9,07±0,20 и 9,66±0,20 соответственно, концентрация гемоглобина 149,12±2,34 и 157,12±2,34 г/л, гематокрит 52,95±2,32 и 48,95±2,32 %. Как и в предыдущих случаях, MCV, среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците, средняя концентрация гемоглобина и расчетная ширина распределения эритроцитов по объему существенно не изменялась.
Общее число тромбоцитов претерпевало изменения и в конечном итоге статистически достоверно снизилось к 60 суткам эксперимента до 613,80±39,82×109/л. Процентное содержание нейтрофилов статистически достоверно снижалось с контрольных значений — 17,50±4,98 до 8,36±0,26 к 30 суткам и 5,36±0,26 к 60 суткам экспериментального исследования. Процентное содержание лимфоцитов волнообразно изменялось и составило 62,44±0,50% к 6 суткам, 4,74±0,50 % к 30 суткам и 26,54±0,50 к 60 суткам. По уровню эозинофилов существенных различий не выявлено.
Дозировка «Сапанокс-иммуно+» в количестве 54 мг/кг вызывает следующие изменения гемоцитограммы: так общее число лейкоцитов, статистически достоверно возрастает на 6 сутки до 8,66±0,23×109/л, к 30 суткам достигает 7,73±0,23×109/л и снижается к 60 суткам до 3,92±0,23 ×109/л.
По показателям красной крови, том числе уровня эритроцитов, гемоглобина, гематокрита имелись статистически достоверные изменения, но они находятся в пределах физиологической нормы. Средний объем эритроцита. Общее число тромбоцитов, аналогично предыдущей серии эксперимента снижалось и нарастало, что возможно связано не только с примом препарата, но и с физиологическими биологическими циклами у экспериментальных животных. Процентное содержание нейтрофилов снижалось до 5,16±0,26 % к шестым суткам, и возрастало до 9,09±0,26 % к 60 суткам приема препарата. Процентное содержание лимфоцитов в свою очередь достоверно увеличивалось и максимально было к 47,84±0,50 суткам. Уровень эозинофилов статистически возрос к 30 суткам проведения экспериментального исследования до 0,34±0,14×109/л (Р≤0,001).
Таким образом, анализируя гематологические показатели экспериментальных животных на фоне приема препарата «Сапанокс-иммуно+» выявлено что, «Сапанокс-иммуно+» при интраназальном введении в дозировке 6 и 18 мг/кг стимулирует возрастание общего числа лейкоцитов к 30 суткам в 2,7 раза.
Также введение препарата приводит к относительному возрастанию эритроцитов, гемоглобина и гематокрита что свидетельствует в пользу снижения объема циркулирующей крови у экспериментальных животных. Процентное содержание нейтрофилов статистически достоверно снижалось, увеличился уровень лимфоцитов. Уровень эозинофилов к 60 суткам статистически достоверно возрос в 8 раз что позволяет рекомендовать изучение аллергизирующих свойств у данного препарата. Дозировка «Сапанокс-иммуно+» в количестве 54 мг/кг о показателям красной крови, том числе уровня эритроцитов, гемоглобина, гематокрита имелись статистически достоверные изменения, но они находились в пределах физиологической нормы. Процентное содержание лимфоцитов статистически достоверно (Р≤0,001) увеличивалось, уровень эозинофилов статистически возрос к 30 суткам проведения экспериментального исследования до 0,34±0,14×109/л (Р≤0,001).
Таким образом, интраназальное введение препарата «Сапанокс-иммуно+» в дозе 6 и 18 мг/кг стимулирует увеличение лейкоцитов к 30 суткам в 2,7 раза (Р≤0,001). Со стороны красной крови «Сапанокс-иммуно+» провоцирует сгущение периферической крови, по данным гематокрита, процент нейтрофилов снижается, уровень лимфоцитов возрастает (Р≤0,001). Уровень эозинофилов на 60 сутки возрастает в 8 раз (Р≤0,001). Эозинофилия свидетельствует о наличии аллергизирующего действия препарата.
Список литературы
- Абрамов В.В. Интеграция иммунной и нервной системы. Новосибирск: Наука, 1991.-212 с.
- Пастушенков Л.В., Лесиовская Е.Е.Фармакотерапия с основами фитотерапии.-СПБ,1995,ч.3, стр.186.
- Geha R. S. Primary immunodeficiency diseases: an update from the International Union of Immunological Societies Primary Immunodeficiency Diseases Classification Committee / R. S. Geha, L. D. Notarangelo, J. L. Casanova [et all.] // J. Allergy Clin. Immunol. – 2007.Vol. 120.– P. 776 – 794.
- White B.T. Effects of temperature stress son grow the performance and bacon quality in grow-finish pigs house dattwo densities / B.T. White // Journal of Animal Science. – 2008. — Vol.86, Iss.8.-P.1789-1798.
- «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Под ред. Р.У.Хабриева). -М. –Медицина. -2005. -827 с.[schema type=»book» name=»ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ У ЖИВОТНЫХ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩЕГО ПРЕПАРАТА «САПАНОКС-ИММУНО+»» description=»Изучена хроническая токсичность иммуностимулирующего препарата «Сапанокс-иммуно+» в дозах 6 мг/кг, 18 мг/кг, 54 мг/кг. Интраназальное введение препарата «Сапанокс-иммуно+» в дозе 6 и 18 мг/кг стимулирует увеличение лейкоцитов к 30 суткам в 2,7 раза (Р≤0,001). Со стороны красной крови «Сапанокс-иммуно+» провоцирует сгущение периферической крови, по данным гематокрита, процент нейтрофилов снижается, уровень лимфоцитов возрастает (Р≤0,001). Уровень эозинофилов на 60 сутки возрастает в 8 раз (Р≤0,001). » author=»Аблайханова Нуржанят Татухановна, Тусупбекова Гульмира Аблаевна, Аблайханова Нурзат Татухановна » publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2016-12-26″ edition=»euroasia-science.ru_26-27.02.2016_2(23)» ebook=»yes» ]