Одним из самых распространенных и социально-значимых заболеваний желудочно-кишечного тракта считается гастрит – воспаление слизистой оболочки желудка, при котором происходит нарушение восстановления слизистой, изменяется секреция желудочного сока и нарушается его сократительная активность. Статистические данные свидетельствуют о том, что более 50% трудоспособного населения развитых стран страдает данным заболеванием, причем с возрастом заболеваемость заметно увеличивается, среди больных гастритом 80% людей страдают хронической формой, причём атрофический гастрит наблюдается у 5% больных, которым менее 30 лет, и 50 -70% у больных достигших возраста 50 лет. Причиной возникновения гастрита в 50-70% случаев является патогенное действие бактерии Helicobacter pylori. При этом, более высокая заболеваемость отмечается среди людей, имеющих группу крови О(I). Первичные и вторичные иммунодефициты также повышают риск возникновения злокачественных новообразований в желудочно-кишечном тракте [1].
Сосудистая теория патогенеза гастрита и язвообразования, выдвинутая Р. Вирховом в 1853 г. [2], заключающаяся в нарушении кровоснабжения участка стенки желудка (тромбоз сосудов, эмболия), последующими атрофическими изменениями слизистой оболочки (ишемические повреждения), на сегодняшний день подтверждена множеством исследований, доказывающих важную роль сосудистого компонента. Показано, что в зоне язвенного повреждения выявляются склеротические поражения терминальных артериол и их облитерация, расширение вен и капилляров расстройство микроциркуляции, помимо этого, показано увеличение частоты образования гастрита и язв у лиц с выраженным стенозом чревного ствола и со специфическими изменениями сосудов подслизистого слоя, характерными для артериальной гипертензии и сахарного диабета, ишемии, которая оказывает влияние на состояние защитного слизистого барьера.
Материалы и методы
Исследования проводились в Экспериментальной клинике-лаборатории биологически активных веществ ФГБНУ «ВНИИП им В.М. Горбатова». Эксперименты выполнены на крысах линии Wistar (n=30) с исходной массой 220±10 г, которые были разделены на 2 группы – опыт и интакт. Животных содержали в стандартных условиях вивария при одинаковом уходе и питании, световом и температурном режиме, со свободным доступом к воде. Для моделирования гастрита у лабораторных животных опытной группы применяли классическую модель аспиринового повреждения слизистой оболочки желудка (СОЖ): на протяжении 7 суток животным ежедневно внутрижелудочно вводили ацетилсалициловую кислоту (из расчета 300 мг/100 г массы). После развития заболевания животных содержали в обычных условиях вивария на протяжении 14 суток. По окончании эксперимента проводили макроскопическое патологоанатомическое исследование, отбирали кровь и образцы дна желудка для гистологического исследования. Гистологические срезы желудков животных приготавливали с использованием вакуумного инфильтрационного процессора Tissue-Tek VIP 5 Jr и ротационного микротома Rotary microtome HM (толщина срезов 6-8 мкм) и оценивали в соответствии с системой OLGA-2008.
Общее клиническое исследование цельной крови животных проводили на полностью автоматическом ветеринарном гематологическом анализаторе Abacusjuniorvet 2.7 (DiatronMesstechnikGmbH, Австрия), определяли 18 показателей: лейкоциты, лимфоциты, содержание смеси моноцитов, эозинофилов, базофилов и незрелых клеток, гранулоциты, лимфоциты, миелоциты, относительное содержание гранулоцитов, эритроциты, гемоглобин, гематокрит, средний объем эритроцита, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, ширина распределения эритроцитов, тромбоциты, тромбокрит, средний объем тромбоцита, распределение тромбоцитов.
Все манипуляции с животными осуществлялись в соответствии с Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей, требованиями приказа МЗ РФ №267 от 19.06.2003г. «об утверждении правил лабораторной практики», требованиями приказа МЗ СССР № 742 от 13.11.84 г. «об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и № 48 от 23.01.85г «о контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных», международными правилами гуманного обращения с животными.
Результаты исследований
Результаты патологоанатомического исследования по окончании эксперимента показали, что у крыс опытной группы отмечалось острое вздутие желудка и кишечника, содержимое кашицеобразное от желто-белого до охрянно-коричневого цвета, в 20% случаях обнаруживались сгустки крови, слизистая оболочка желудка отечная, сглаженная, гиперемированная. На слизистой оболочке желудка наблюдались различного рода эрозии и геморрагии: в 100 % случаях обнаруживались точечные кровоизлияния, преимущественно в пилорическом отделе, в 80 – 60 % случаях наблюдались эрозии, сохранялись язвенные дефекты.
Гистологические исследования показали, что у животных с аспириновым гастритом выявлены признаки, характерные для хронического гастрита различной степени. Первая степень гастрита отмечалась у 30% животных, в 20% случаев выявлялось восстановление поверхностного эпителия, при этом выявлены признаки поражения желудочных желез, как тела, так и базальных отделов. Вторая степень ХГ отмечалась у 50% лабораторных животных. Атрофический гастрит в фазе обострения, с атрофическими изменениями слизистой оболочки желудка, наблюдался у 8% крыс, при этом, ХГ III степени с сильным поражением собственной пластинки отмечался у 6% животных, ХГ IV степени с избытком слизи, явно выраженным поражением собственной пластинки отмечался у 2% животных (рис 1).
При анализе гематологических показателей крови опытных животных с моделью гастрита, выявлено выраженное увеличение количества лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов, гранулоцитов. При этом, у 35% опытных животных наблюдался выраженный лимфоцитоз, у такой же доли животных, напротив, отмечалась лимфопения; у 20% отмечался гранулоцитоз, у 33% животных, напротив, отмечался выраженный агранулоцитоз. Кроме того, у 27% животных данной группы отмечался выраженный лейкоцитоз. Содержание эритроцитов, гемоглобина в эритроцитах, тромбоцитов отличалось низким уровнем, по сравнению с показателями интактных животных (Табл.1).
Табл.1 Гематологические показатели крови лабораторных животных
| Параметры | Норма | Группа животных | |
| Опыт | Интакт | ||
| Лейкоциты, 109/л | 6,68-10,63 | 11,3±1,5 | 8,8±2,2 |
| Лимфоциты, 109/л | 5,69-8,5 | 8,8±0,9 | 6,7±0,4 |
| Содержание смеси моноцитов, эозинофилов, базофилов и незрелых клеток, 109/л | 0,04-0,13 | 0,16±0,01 | 0,06±0,01 |
| Гранулоциты, 109/л | 1,35-4,51 | 2,81±0,9 | 2,5±0,7 |
| Лимфоциты, % | 77,8-80,4 | 81,1±7,4 | 77,2±3,9 |
| Моноциты, % | 0,56-1,0 | 1,6±0,1 | 0,68±0,17 |
| Относительное содержание гранулоцитов, % | 19,1-21,6 | 15,1±4,4 | 19,7±2,8 |
| Эритроциты, 1012/л | 6,47-8,83 | 7,0±0,5 | 7,7±0,4 |
| Гемоглобин, г/л | 139-150 | 143,7±8,5 | 146,9±4,1 |
| Гематокрит, % | 39,09-45,27 | 39,5±1,2 | 37,9±1,4 |
| Средний объем эритроцита, мкм3 | 49-56 | 50,2±3,7 | 51,5±1,9 |
| Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг | 16,9-19,6 | 18,6±0,6 | 19,1±1,3 |
| Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, г/л | 333-355 | 371,7±6,2 | 353,2±2,4 |
| Ширина распределения эритроцитов, % | 15,0-18,5 | 15,7±0,9 | 16,4±0,7 |
| Тромбоциты, 109/л | 677-915 | 737,9±46,9 | 825,4±43,4 |
| Тромбокрит, % | 0,51-0,71 | 0,47±0,05 | 0,59±0,07 |
| Средний объем тромбоцита, мкм3 | 6,5-7,4 | 6,5±0,4 | 6,6±0,3 |
| Распределение тромбоцитов | 32,2-34,5 | 32,3±1,1 | 32,8±0,4 |
Повышение лейкоцитов и моноцитов в крови у 27% животных, увеличение содержания в крови всех видов гранулоцитов: базофильных, нейтрофильных, эозинофильных, свидетельствует о развитии воспалительного процесса, при этом, увеличение количества лимфоцитов у 35% животных, говорит о наличии адекватного иммунного ответа на развитие воспаления [3]. Возникновение у такой же доли животных лимфопении связано с миграцией лимфоцитов к очагу воспаления (язвенным образованиям). Возникающий у 33% животных выраженный имунный (гаптеновый) агранулоцитоз, связан с едедневным приемом ацетилсалициловой кислоты.
Стоит отметить, что выявленное уменьшение среднего объема эритроцита и снижение концентрации гемоглобина на фоне увеличения средней концентрации гемоглобина в эритроцитах указывает на анемию, нарушение синтеза гемоглобина и микроцитозу. Тромбоцитопения, связанная со снижением образования тромбоцитов, показывает наличие интоксикации ацетилсалициловой кислотой, уменьшение среднего объема – снижение синтеза тромбоцитов [3].
Данные изменения выявлены в крови животных, у которых в соответствии с системой ОLGA-2008, выявлена II-IV степень хронического гастрита. У животных с I степенью наблюдалась неосложненная форма ХГ, без обширных язвенных поражений, о чем свидетельствует значительное повышение количества лейкоцитов на фоне снижения лимфоцитов к показателям интактных животных[3].
Таким образом, сопоставление результатов общего исследования крови и данными гистологических исследований срезов желудков, позволило выявить основные сдвиги гематологических показателей. Так, при гастрите первой степени в крови увеличивается количество лейкоцитов и снижается содержание лимфоцитов; при дальнейшем развитии гастрита (от второй до четвертой степени) наблюдается увеличение содержания в крови всех видов гранулоцитов: базофильных, нейтрофильных, эозинофильных, что свидетельствует о дальнейшем аутохронном язвообразовании; уменьшение среднего объема эритроцита и снижение концентрации гемоглобина на фоне увеличения средней концентрации гемоглобина в эритроцитах; снижение синтеза тромбоцитов.
Список литературы:
1.Маколкин В.И., Внутренние болезни: учебник – 6-е изд., перераб. И доп./В.И. Маколкин, С.И.Овчаренко, В.А. Сулимов. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012
2.Малис Ю.Г. Рудольф Вирхов. Его жизнь, научная и общественная деятельность/ С-Пб.: Типография Высочайше утвержд. товарищества «Общественная польза», 1899 г. — 80 с.
3.Назаренко Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований./ Г.И. Назаренко, А.А. Кишкун– М.: Медицина, 2000. — 544 с.[schema type=»book» name=» Взаимосвязь экспериментального гастрита с гематологическими показателями крови» description=»В статье представлены результаты исследований, в рамках которого определены и оценены стадии развития хронического гастрита посредством сопоставления гематологических показателей крови с результатами гистологических исследований желудков лабораторных животных с моделью гастрита.» author=»Федулова Лилия Вячеславовна, Сорокина Анастасия Алексеевна» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-02-23″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_25.07.15_07(16)» ebook=»yes» ]