Номер части:
Журнал
ISSN: 2411-6467 (Print)
ISSN: 2413-9335 (Online)
Статьи, опубликованные в журнале, представляется читателям на условиях свободной лицензии CC BY-ND

ОЦЕНКА СТАБИЛЬНОСТИ ГИБРИДНЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ Е7-HSP70



Науки и перечень статей вошедших в журнал:
DOI:
Дата публикации статьи в журнале:
Название журнала: Евразийский Союз Ученых — публикация научных статей в ежемесячном научном журнале, Выпуск: , Том: , Страницы в выпуске: -
Данные для цитирования: . ОЦЕНКА СТАБИЛЬНОСТИ ГИБРИДНЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ Е7-HSP70 // Евразийский Союз Ученых — публикация научных статей в ежемесячном научном журнале. Фармацевтические науки. ; ():-.

В процессе производства терапевтических рекомбинантных белков необходимо проведение контроля качества и оценки их стабильности. Это обусловлено высокой чувствительностью рекомбинантных белков к факторам окружающей среды, что требует соблюдения строгих условий хранения. Поэтому оценка стабильности должна проводиться не только готовой лекарственной формы лекарственного средства, но и ее полупродуктов для гарантии безопасности и эффективности фармацевтического продукта и обеспечения оптимального производственного процесса [8, 10].

В ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов» была разработана терапевтическая вакцина против рецидивирующего респираторного папилломатоза и аногенитального кондиломатоза. Готовая вакцина представляет собой стерильную суспензию для инъекций, которая содержит в прививочной дозе (0,5 мл) гибридные рекомбинантные белки (слитые последовательности онкобелка Е7 ВПЧ (типов 6 и 11) и белка теплового шока HSP70 Mycobacterium tuberculosis (200 мкг)), сорбированные на алюминия гидроксиде (не более 1,25 мг алюминия/на 1 дозу) [2, 3].

Долгосрочные испытания стабильности рекомбинантных белков, входящих в состав готовой лекарственной формы, необходимы для подтверждения адекватности разработанного проекта спецификации основным свойствам исследуемого объекта [7, 8].

Целью в долгосрочных исследованиях является оценка стабильности основных физико-химических свойств гибридных рекомбинантных белков Е7(6)-HSP70 и Е7(11)-HSP70 при специфицированной температуре хранения [1, 6, 8].

Разработанная программа исследования стабильности включала определение критических свойств целевых белков, которые чувствительны к условиям хранения, и мониторинг физико-химических и биологических параметров, которые гарантируют отсутствие изменений качества препарата [6, 8, 9].

Разработка программы оценки стабильности осуществлялась в соответствии с международными и отечественными требованиями (Табл.) [4, 5, 8].

Для проведения испытаний были наработаны 3 серии субстанции гибридного рекомбинантного белка Е7(6)-HSP70 и 3 серии субстанции гибридного рекомбинантного белка Е7(11)-HSP70. По внешним признакам это плотная беловатого цвета масса, затвердевающая при температуре минус (20  ± 2) ºС. Полученные полупродукты готовой лекарственной формы терапевтической вакцины были упакованы по 50 мл в стерильных контейнерах вместимостью 60 мл из полиэтилентерефталат-гликоля с резьбовым колпачком из полиэтилена высокой плотности.

На хранение закладывали количество субстанции, рассчитанное в соответствии с программой оценки стабильности с запасом не менее 50 %, составляющим арбитражные и контрольные образцы. Тестировали препараты с интервалом 3 месяца (Таблица).

В соответствии с рекомендациями ICH Q5C специфицированные параметры качества рекомбинантных белков, которые не связаны с биодеградацией препарата (ДНК штамма-продуцента, белки штамма-продуцента, стерильность) не контролировали в промежуточных точках, но оценивали при выходном контроле продукции и по окончании и продлении срока годности [8].

Для каждой тестируемой серии составляли  индивидуальный план-график тестирования, содержащий информацию о датах (месяц и год) тестирования и объеме выполняемых анализов.

Проведенные исследования показали, что специфицируемые показатели качества субстанций не выходили за нормированные пределы, обеспечивая стабильность белка в заявленной первичной упаковке на протяжении всего срока годности и его продления. Срок годности на основании экспериментальных данных по всем специфицированным параметрам рекомбинантных белков Е7(6)-HSP70 и Е7(11)-HSP70 составил 12 месяцев.

Список литературы.

  1. Государственная Фармакопея Российской Федерации ХII. Часть I. М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения; 2008.
  2. Козлов Д.Г., Чеперегин С.Э., Губайдуллин И.И., Ефремов Б.Д., Тюрин О.В., Залунин И.А. Способ получения белка Е7-HSP70 и штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae для его осуществления. Патент РФ № 2489481, 2013.
  3. Кухаренко А.Е., Гаврилова Н.А., Гравель И.В., Хамитов Р.А. Технология получения и контроль качества терапевтической вакцины против ВПЧ-ассоциированных заболеваний// Сеченовский вестник № 2(16) 2014 г. С. 91.
  4. Кухаренко А.Е., Гаврилова Н.А., Сауткина Е.Н., Гравель И.В., Хамитов Р.А. Методические подходы к контролю качества терапевтических вакцин против ВПЧ-ассоциированных заболеваний// Биопрепараты. 2014; (4): 14-23.
  5. Кухаренко А.Е., Гравель И.В., Гаврилова Н.А. Методы контроля подлинности инновационной терапевтической вакцины на основе композиции рекомбинантных белков Е7-HSP70// Сборник материалов I Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Инновации в здоровье нации». Санкт-Петербург. 20 ноября 2013 г. – СПб.: Изд-во СПХФА, 2013. С. 152-153.
  6. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (иммунобиологические лекарственные препараты). Часть вторая / Под ред. А.Н. Миронова. — М.: Гриф и К, 2012. — 536 с.
  7. ICH Topic Q1 (R2) Stability testing guidelines: Stability testing of new drug substances and product (CPMP/ICH/380/95)
  8. ICH Topic Q5C Stability testing of biotechnological/biological products (CPMP/ICH/138/95)
  9. ICH Topic Q6B Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotechnological/Biological Products (CPMP/ICH/365/96).
  10. WHO Guidelines on the quality, safety, and efficacy of biotherapeutic protein products prepared by recombinant DNA technology.

Таблица. Испытание стабильности гибридных рекомбинантных белков Е7(6)-HSP70 и Е7(11)-HSP70

Наименование показателя Метод испытания Спецификация Частота и период контроля хранения, месяц
0 3 6 9 12 12+1
Описание ГФ XII, визуальный Прозрачный, бесцветный раствор + + + + + +
Подлинность Вестерн-блот Подвижность основных полос испытуемого образца должна соответствовать подвижности полос стандартного образца предприятия. + + + + + +
Прозрачность раствора ГФ XII, визуальный Должна быть прозрачной + + + + + +
Цветность раствора ГФ XII, визуальный Должна быть бесцветной по сравнению с водой. + + + + + +
рН ГФ XII, потенциометрический От 7,0 до 7,6. + + + + + +
Содержание белка ГФ XII, метод с бицинхиноновой кислотой Не менее 1,0 мг/мл + + + + + +
Посторонние примеси Электрофорез в ПААГ в восстанавливающих условиях с окраской Кумасси R-250 Интенсивность основной полосы должна составлять не менее 95% + + + + + +
Электрофорез в ПААГ в невосстанавливающих условиях с окраской Кумасси R-250 Суммарная интенсивность основных полос должна составлять не менее 95% + + + + + +
Чистота ВЭЖХ, гель-фильтрация Суммарное содержание основного вещества в двух пиках не менее 97,0 % + + + + + +
ДНК штамма-продуцента Иммуноферментный анализ с использованием Threshold системы Не более 20,0 пг на 1,0 мкг белка

 

+ + +
Белки штамма-продуцента Иммуноферментный анализ Не более 0,1 нг на 1,0 мкг белка. + + +
Стерильность ГФ ХII, метод мембранной фильтрации Должна быть стерильной. + + +
Бактериальные

эндотоксины

ГФ ХII, качественный анализ (Метод А) Не более 20 ЕЭ / мг белка + + + + + +
Аномальная токсичность ГФ ХII, биологический

 

Должна быть нетоксичной. + + + + + +
Полисорбат 80 ВЭЖХ, обращенно-фазовая хроматография Не менее 0,002 % и не более 0,008 %. + + + + + +

Обозначения: + — испытания показателя проводятся; испытания показателя не проводятся[schema type=»book» name=»ОЦЕНКА СТАБИЛЬНОСТИ ГИБРИДНЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ Е7-HSP70″ author=»Кухаренко Андрей Евгеньевич, Гаврилова Наталья Андреевна, Ловцова Любовь Валерьевна, Гравель Ирина Валерьевна» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-06-16″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_ 30.12.2014_12(09)» ebook=»yes» ]

Список литературы:


Записи созданы 9819

Похожие записи

Начните вводить, то что вы ищите выше и нажмите кнопку Enter для поиска. Нажмите кнопку ESC для отмены.

Вернуться наверх
https://www.apscuf.org/slot-gacor/slot gacorslot onlineslot gacorslot gacorslot gacorslot gacorslot gacorhttps://bxartsfactory.org/slot-gacor-maxwin/https://www.splayce.eu/slot-pulsa/https://esign.bogorkab.go.id/vendor/bin/https://snip.eng.unila.ac.id/wp-content/uploads/slot-gacor/http://desa-bolali.klatenkab.go.id/files/slot-gacor/https://www.jurnal.stimsurakarta.ac.id/public/journals/https://kobar.umkm.kalteng.go.id/files/slot-gacor/https://www.uniqhba.ac.id/assets/slot-gacor/https://www.staipibdg.ac.id/-/slot-online-gacor/https://disdagperin.bekasikota.go.id/slot-gacor/https://journal.widyatama.ac.id/slot-gacor/https://stis.ac.id/slot-gacor/https://gradosyposgrados.ucjc.edu/https://ejurnal.iainlhokseumawe.ac.id/public/slot-deposit-pulsa/ https://www.mope.gm/slot88/https://www.vantru.is/slot88/https://vipnumberbuy.com/slot-deposit-pulsa/https://bio-med.euroasia-science.ru/slot-deposit-dana/https://fastgoal.com/forum/-/slot-gacor/https://www.gamisaulia.com/slot-gacor/https://persianfootball.com/news/wp-content/uploads/2013/01/slot-gacor/https://radiochicha.perugamingshow.com/https://empleabilidad.uigv.edu.pe/slot-gacor/https://civil.annauniv.edu/slot-gacor/https://majubersamagroup.com/slot-gacor/https://fais.psu.ac.th/slot88/https://www.gardencity.university/slot-gacor/http://admission.mnsuam.edu.pk/slot-gacor/https://www.yckmc.edu.hk/slot-gacor/https://www.revistaamexco.com.mx/files/journals/1/articles/51/62c7819f6a734.htmlhttps://www.edithumbs.com/wp-content/uploads/2020/01/slot-gacor-deposit-dana/https://regencyinstitutions.com/uploads/https://beritarajaku.com/http://arc.salleurl.edu/develop/slot-deposit-pulsa/https://www.ducayne100.org/slot-gacor/https://parasolprojects.com/slot-gacor/https://www.kotabaruparahyangan.com/slot-gacor/http://discamino.org/slot-gacor/https://cmc.edu.vn/slot-gacor/https://www.kpsg-solutions.pt/slot-deposit-dana/https://katingankab.go.id/slot-online/http://sintang.go.id/slot-gacor/https://text.co.id/slot-gacor/https://www.stimsurakarta.ac.id/slot-gacor/http://www.loasis-traiteur.com/fileman/https://sipil.ft.unesa.ac.id/slot-gacor/https://kemahasiswaan.unesa.ac.id/slot-gacor/https://empleabilidad.uigv.edu.pe/slot-gacor/https://surjyotsna.org/slot88/https://unitedtowel.com/slot-deposit-pulsa/http://gpm.fe.unesa.ac.id/slot88/https://eapi.sabayon.org/https://www.zeleka.com/slot-gacor/https://nclthailand.com/slot88/https://ft.unesa.ac.id/slot-gacor/https://bot.unesa.ac.id/slot-deposit-pulsa/https://optical.botsolutions.org/slot-gacor/https://www.test-car.pt/slot-gacor/https://ejurnal.methodist.ac.id/files/slot-online/https://jurnal.kwikkiangie.ac.id/files/slot-gacor/https://www.amikmbp.ac.id/slot88/https://ifris.org/slot-gacor/https://biomedicineonline.org/slot-gacor/http://e-journal.sastra-unes.com/slot-gacor/https://www.rtpslotgacor.cc/https://www.fundacionclavel.org/situs-slot-gacor/https://www.fundacionclavel.org/slot88/https://ksrce.ac.in/gacor88/https://sushizobangkok.com/slot88/http://huaplachongnonsea.com/slot-gacor/https://enfermeriadermatologica.org/slot-gacor/http://www.rpchospital.com/slot-gacor/https://www.feiradossofas.pt/slot-gacor/https://sites.google.com/view/slot-gacor-terbaru-hari-ini/https://www.viagsite.com/https://bio-med.euroasia-science.ru/slot-deposit-dana/https://165.22.244.0/https://www.rtppastigacor88.com/http://enfermeriadermatologica.org/slot777/https://slot88.ice.edu.pt/https://belodent.org/-/slot-pulsa/https://history.soc.ku.ac.th/uploads/slot-gacor/https://www.kemasaja.com/slot-gacor/http://www.maktour.co.id/slot-gacor/https://seamolec.org/files/slot-gacor/https://sbyads.ru/slot88/http://www.woconf.com/slot-gacor/https://omnipacgroup.com/slot-gacor/https://icdemolicensewebapi.honeywell.com/https://www.fundacionclavel.org/slot-gacor/ gacor 88https://sshj.in/public/slot-deposit-dana/https://mbmscience.com/public/slot88/situs slot gacorhttps://peshawarhighcourt.gov.pk/slot-gacor/https://www.doutoresdoexcel.com.br/-/slot-gacor/https://mccm.ptcer.pl/slot-demo/https://academconsult.ru/slot-gacor/https://nje.org.na/slot-deposit-dana/https://journals.tma.uz/slot-gacor/https://muru.com.co/slot-deposit-pulsa/https://coresdaterra.com.br/slot-gacor/https://sasurie.com/slot-gacor/https://thejrns.org/slot-gacor/http://a0729171.xsph.ru/https://zombiigrice.com/slot-gacor/https://ijohmn.com/public/slot-gacor/https://www.kuhoo.com/wp-content/uploads/slot-deposit-dana/http://clc.cet.edu/judi-bola/https://www.ijmaberjournal.org/slot-gacor/https://ijorces.org/slot-gacor/https://virtusclean.com/slot-online/https://modernacademy-journal.synceg.net/slot-gacor/https://artescienza.org/wp-content/uploads/slot-gacor/https://journal.icter.org/public/slot-gacor/https://rumosdainformacao.ivc.br/5unsur3/https://dailyexpresstop.com/https://livepublicnews.com/https://cosy.univrab.ac.id/slot-online/https://www.unaki.ac.id/togel88/https://staialakbarsurabaya.ac.id/slot-online/https://iat.alfithrah.ac.id/slot-gacor/https://krti.unesa.ac.id/slot-deposit-pulsa/https://scuto.co.id/slot-online/http://jurnal.umsu.ac.id/public/