Номер части:
Журнал

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ γ-ОБЛУЧЕНИЯ И СОЕВОГО БЕЛКА, БОГАТОГО ИЗОФЛАВОНАМИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА РАННИХ СРОКАХ РАЗВИТИЯ ОПУХОЛИ САРКОМА-180



Науки и перечень статей вошедших в журнал:


DOI:
Дата публикации статьи в журнале:
Название журнала: Евразийский Союз Ученых, Выпуск: , Том: , Страницы в выпуске: -
Автор:
, ,
Автор:
, ,
Автор:
, ,
Анотация:
Ключевые слова:                     
Данные для цитирования: . СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ γ-ОБЛУЧЕНИЯ И СОЕВОГО БЕЛКА, БОГАТОГО ИЗОФЛАВОНАМИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА РАННИХ СРОКАХ РАЗВИТИЯ ОПУХОЛИ САРКОМА-180 // Евразийский Союз Ученых. Биологические науки. ; ():-.





На сегодняшний день γ-облучение, наряду с химиотерапией,   продолжает входить в число наиболее распространенных средств воздействия на рост и развитие злокачественных новообразований. Однако несмотря на использование для лучевой терапии опухолей новейшей аппаратуры и точные расчеты уровня воздействия, эффективность γ-облучения в плане повреждающего воздействия на опухолевые клетки не является абсолютной. Кроме того, лучевая терапия сопровождается проявлением ряда тяжелых побочных действий, самым значимым из которых является нарушение кроветворения и дестабилизация иммунной системы организма, подвергшегося такому воздействию [4, 6].

В связи с этим актуальным является поиск возможностей снижения побочного действия лучевой терапии. Решение данной проблемы возможно лежит в применении средств, нивелирующих или снижающих негативные последствия γ-облучения на организм, или же средств, обладающих тормозящим рост опухоли воздействием, не менее эффективных, чем γ-облучение, но не оказывающих тяжелых побочных эффектов. В идеале такие средства могли бы стать адекватной заменой лучевой терапии.

В Институте биоорганической химии АН РУз получена стандартизированная комбинация полипептидов из соевой муки с молекулярной массой 12,5-79,0 кДа, обогащенная изофлавонами (содержание дайдзеина на грамм белка составляет в среднем 1,20±0,03 мг, генистеина – 2,3±0,2 мг). Ранее нами были получены результаты по противоопухолевой активности белкового препарата (терапевтическая доза 75 мг/кг) сопоставимой с цитостатиком 5-фторурацилом (доза 228 мг/кг). Соевый белок, вводимый в монорежиме, вызывает торможение роста опухоли (ТРО) до 71,0% по массе и до 78,2% по объему, 5-фторурацил, вводимый в монорежиме 74,2% по массе и 71,0% по объему. Комплексное введение 5-фторурацила и соевого белка  увеличило значение показателя ТРО на 22-26%; в итоге при данном режиме терапии ТРО составило 92,7% по массе и 96,9% по объему [1, с. 68].

Целью данного исследования стала сравнительная оценка биологической и противоопухолевой активности γ-облучения и соевого белка на раннем этапе развития опухоли (3–13 день после перевивки опухолевого штамма).

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на 60 беспородных мышах — самцах, с первоначальной массой тела 18-23 г. Животные содержались в типовом виварии на обычном рационе питания. Перед началом опыта мышей выдерживали с целью адаптации к условиям вивария в течение 1 недели (по 5 особей в пластмассовой клетке). В каждую группу изначально было включено по 15 животных.

Трансплантацию солидной опухоли саркома-180 (С180) производили гомогенатом опухолевой ткани в стерильном физиологическом растворе. Животных-доноров умерщвляли смещением шейных позвонков, вырезали кусочки опухоли без некротических участков и измельчали их при помощи пресс-измельчителя. Полученную массу опухоли разводили стерильным физиологическим раствором; взвесь опухолевых клеток вводили мышам подкожно в область бедра по 0,2 мл [3].

Противоопухолевая терапия проводилась при моновоздействии (I группа – соевый белок, III группа – γ-облучение) и комплексном воздействии (II группа  – соевый белок + γ-облучение). IV группа являлась контрольной (животные-опухоленосители, без терапевтического воздействия).

Облучение животных-опухоленосителей (II и III-группы) проводили трехкратно – на 5-й, 7-й и 9-й день после перевивки опухоли, при тотальном воздействии. Облучение выполнено на радиотерапевтической установке «Рокус» γ-лучами 60Со. Разовая доза составила 2 Гр, суммарная доза – 6 Гр.   Используемая в эксперименте доза γ-облучения  была выбрана в соответствии с целью исследования и на основе данных литературы [2, 7].

Препарат растворяли в дистиллированной воде и вводили зондом в желудок мышам с саркомой-180 в дозе 75 мг/кг (I и II группы животных) начиная с третьего дня после перевивки опухоли. Пероральное введение продолжали ежедневно (за исключением воскресенья) в течение 10 дней. Используемая в эксперименте доза соевого белка (75 мг/кг) была выбрана в соответствии с целью исследования и на основе ранее полученных результатов.

Контрольная группа животных-опухоленосителей (IV группа)  лечебным воздействиям не подвергалась.

Забой проводился на 20-й день после перевивки опухоли. На 7 сутки с момента последнего терапевтического воздействия, животных умерщвляли путем декапитации.

Оценка эффективности применяемых лечебных воздействий.

У каждого животного выделяли опухолевый узел, проводили его измерение в трех проекциях (a, b, c) и взвешивание. Объем  опухоли (V, см3) вычисляли по формуле [5, с. 647]:

где: a, b и c – длина, ширина и высота опухолевого узла.

Затем вычисляли средний объем (Vср, M±m) и среднюю массу (Мср, M±m) опухоли в  каждой группе животных.

Степень торможения роста опухоли определяется по показателям ТРО. Процент ТРО по массе опухолевого узла  вычисляли по формуле [5, с. 647]:

где: М – средняя масса опухоли (г) в подопытной и контрольной группах, соответственно, на конкретный срок.

Процент ТРО по объему опухолевого узла  вычисляли по формуле [5, с. 647]:

где: V – средний объем опухоли (см3) в подопытной и контрольной группах, соответственно, на конкретный срок.

Дополнительно, наряду с противоопухолевым эффектом, исследовали  гепатотропное и спленотропное действие проводимой терапии методом сравнительной оценки массы печени и селезенки (г) и визуально-тактильной  оценки цвета, макроструктуры и консистенции данных органов у животных опытных и контрольной групп.

Результаты и обсуждение. Согласно принятым Критериям эффективности, противоопухолевое соединение нового класса, рекомендуемое для клинического изучения, должно вызывать торможение роста солидных опухолей на 70-90% и более,  сохраняющееся не менее 7 суток после отмены вещества [5, с. 638]. Настоящее исследование показало, что через 7 дней с момента окончания лечебного воздействия, соевый белок, вводимый в монорежиме, вызывает торможение роста опухоли до 94,3% по массе и до 95,0% по объему. При введении соевого белка совместно с γ-облучением, значение ТРО по массе составило 91,2% а по объему – 92,0%. Лучевая терапия вызывала ТРО на 85,6% по массе и на  85,0%  по объему  (Таблица 1).

Согласно количественным критериям оценки значимости показателя ТРО для активности противоопухолевых агентов [5, с 647], противоопухолевый эффект изучаемого вещества можно оценить следующим образом:

ТРО<20%                                              0            1 балл

ТРО<20-50%                                         ±            2 балла

ТРО<51-80%                                         +            3 балла

ТРО<81-90%                                         ++          4 балла

ТРО<91-100%+<50% ПР/излечения    +++        5 баллов

ТРО<91-100%+>50% ПР/излечения    ++++      6 баллов

Таблица 1

Сравнительная оценка противоопухолевой активности γ-облучения и соевого белка на раннем этапе развития опухоли (3–13 день после перевивки) по показателю ТРО

Группа

/ доза

Средняя

масса опухоли

(г)

M±m

t p* ТРО

по массе

(%)

Средний

объем опухоли

(см3)

M±m

t p*

ТРО

по объему

(%)

1) Соевый

белок

0,050

± 0,012

2,9 <0,05 94,3 0,105

± 0,031

3,25 <0,05 95,0
2) Соевый

белок

+ γ

0,077

± 0,012

2,8 <0,05 91,2 0,170

± 0,020

2,9 <0,05 92,0
3)      γ 0,126

± 0,046

2,75 <0,05 85,6 0,316

± 0,123

2,9 <0,05 85,0
4) Контроль 0,87

±0,31

 

2,15

±0,77

*  Р  в сравнении с контролем

Примечание:  при сравнении средних значений массы и объема опухоли в опытных группах,  р>0,05 (разница недостоверна).

Если оценивать противоопухолевый эффект соевого белка на основе показателя ТРО  по шестибальной шкале, то в I опытной группе (соевый белок в монорежиме) он равен 5 баллам по массе и 5 – по объему, во II группе (соевый белок совместно с γ-облучением)  – 5  баллам по массе и 4 баллам – по объему. Для сравнения, противоопухолевый эффект γ-облучения, оцениваемый по той же шкале (III группа) равен, 4 баллам по массе и по объему, соответственно.

Было показано, что воздействие γ-облучения и соевого белка на организм животных-опухоленосителей в указанные сроки развития опухоли не приводило к статистически значимым изменениям массы печени ни в одной из подопытных групп. Макроскопический осмотр органа показал, что у 43% животных III-группы (γ-облучение) и 21% животных II-группы (γ-облучение + соевый белок) печень была бледной или цвета кофе с молоком.  В других группах подобные изменения печени встречались у единичных животных (Таблица 2).

Таблица 2

Сравнительная оценка массы печени и селезенки экспериментальных животных в случае применения γ-облучения и соевого белка на раннем этапе развития опухоли Саркома 180

Группа

/ доза

Средняя

масса печени

(г)

M±m

t p* Средняя

масса

селезенки

(г)

M±m

t

p*

1) Соевый

белок

1,45

± 0,07

1,8 >0,05 0,29

± 0,02

3,5 <0,05
2) Соевый

белок  + γ

1,44

± 0,07

1,8 >0,05 0,20

± 0,02

4,8 <0,05
3) γ 1,35

± 0,07

2,3 <0,05 0,20

± 0,02

5,0 <0,05
4) Контроль 1,78

± 0,19

0,51

± 0,07

*  Р  в сравнении с контролем

Примечание:  при сравнении средних значений массы печени и селезенки в опытных группах,  р>0,05 (разница недостоверна).

Во всех опытных группах было отмечено достоверное уменьшение массы селезенки (<0,05).  Причем во II и III группах, с применением воздействия γ-облучения как в монорежиме, так и совместно с соевым белком,  масса  селезенки  была наименьшей  –  по 0,20±0,02 г в каждой группе. В группе с воздействием только соевого белка уменьшение массы селезенки было менее выражено и составило 0,29±0,02 г. Макроскопический осмотр селезенки у животных подопытных и контрольных групп не выявил каких-либо визуальных изменений цвета, формы и консистенции органа  (Таблица 2).

Очаги метастазирования в печени и селезенке не были обнаружены ни у одного животного.

Таким образом, проведенное исследование показало, что соевый белок  обладает высокой противоопухолевой активностью, превосходящей  цитостатическое действие γ-облучения, не оказывая при этом  токсического и гепатотропного действия.

Список литературы

  1. Береснева Ю.В., Ибрагимов Ф.А., Ассесорова Ю.Ю., Юсупова А.А. Сравнительная оценка биологической и противоопухолевой активности 5-фторурацила и соевого белка, богатого изофлавонами // Журнал Теоретической и Клинической Медицины. 2013 год, №3, с. 68-70.
  2. Зорькина А.В., Скопин П.И. Экспериментальная онкология. –2002. –т. 24. –с.59-63.;
  3. Софьина З.П., Сыркин А.Б., Голдин А., Кляйн А. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. –М.: Медицина, 1980. –296 с.
  4. Справочник по онкологии / под редакцией академика РАМН Н.Н.Трапезникова. – Москва. 1996.- Выпуск 4.- 32 с.
  5. Трещалина Е. М., Жукова О. С., Герасимова Г. К. и др. Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ // В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общ. ред. чл.-корр. РАМН, проф. Р. У. Хабриева. –2 изд., перераб. и доп. –М.: Медицина, 2005. –С. 637–651.[schema type=»book» name=»СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ γ-ОБЛУЧЕНИЯ И СОЕВОГО БЕЛКА, БОГАТОГО ИЗОФЛАВОНАМИ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА РАННИХ СРОКАХ РАЗВИТИЯ ОПУХОЛИ САРКОМА-180″ author=»Береснева Юлиана Викторовна, Ибрагимов Фазыл Ахмедович, Ассесорова Юлиана Юрьевна» publisher=»БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА» pubdate=»2017-04-21″ edition=»ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_ 28.03.2015_03(12)» ebook=»yes» ]
Список литературы:


Записи созданы 6778

Похожие записи

Начните вводить, то что вы ищите выше и нажмите кнопку Enter для поиска. Нажмите кнопку ESC для отмены.

Вернуться наверх