К ВОПРОСУ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ И ИХ КОРРЕКЦИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ГЕПАТИТАХ

Актуальность. Серьезность ситуации, сложившей по вирусному гепатиту С, определяется высокой частотой формирования хронических форм, длительным бессимптомным течением, манифестацией заболевания на поздних стадиях (цирроз печени), ассоциацией с развитием гепатоцеллюлярной карциномы [15, 18, 5, 12, 6]. Противовирусная терапия (ПВТ) на сегодняшний день является международным стандартом в лечении ХВГС. Это обусловлено, прежде всего,  доказанной возможностью элиминации РНК-HCV на фоне ПВТ, наблюдаемой по данным ряда авторов у 60-80% больных [19, 2, 13]. С другой стороны,  многочисленными исследованиями  доказана устойчивость вируса гепатита С к ПВТ с возобновлением повторной репликации  [14,10]. Доказано также развитие в ряде случаев изначальной устойчивости к ПВТ, которая обуславливает отсутствие на сегодняшний день у больного шанса на санацию организма от вируса и повышает роль патогенетически ориентированной терапии, позволяющей сохранить печень[14,10,6].

 Любой патологический процесс, в том числе при вирусных гепатитах, сопровождается повышенным образованием свободных радикалов и  связанным с этим усилением процессов пероксидации липидов, что сопровождается нарушением свойств биологических мембран и нарушением функционирования клеток [2, 1]. Основную функцию защиты при активации процессов липопероксидации выполняет антиоксидантная система клеток, недостаточность которой становится одним из факторов активации прооксидантных реакций в организме. Важным компонентом антиоксидантной системы является глутатионзависимое звено, включающее глутатион и зависимые от него ферменты – глутатионпероксидазу, глутатионредуктазу и глутионтрансферазу [4, 1].  Решение вопроса патогенеза морфофункциональной сохранности печени с позиции состояния метаболической адаптации организма в условиях ХВГС позволит повысить эффективность терапии и качество жизни больных.

Целью исследования явилось изучение состояния антиоксидантной системы у больных ХВГС и коррекция патогенетической терапии с учетом изменений глутатионзависимых ферментов.

Материалы и методы. Обследовано 83  пациентов с ХГС в стадии реактивации в возрасте от 19 до 55 лет. Из них мужчин было 30 (36,1%), женщин – 53 (63,9%). Диагноз устанавливался на основании клинико-лабораторных данных, а также результатов  ПЦР (РНК- HCV) и ИФА (анти- HCV). Контрольную группу составили 20 практически здоровых людей с отсутствием маркеров гепатитов. Больные по генотипам вируса С распределились следующим образом: 1генотип — у 46 больного (55,4%), 2 генотип – у 15 больных (18,0%),  3 генотип – у 22 больных (26,6%). Давность заболевания составляла от 5 до 15 лет.

Состояние антиоксидантной защиты определяли по показателям активности глутатиона и глутатионзависимых ферментов. Общий (GS) и, восстановленный (GSH) и окисленный глутатион (GSSG) определяли по Чернышову В.Г. [14]. Активность глутатионзависимых ферментов: глутатионпероксидазы (ГП), глутатионредуктазы (ГР), глутатинтрансферазы (ГТ) определяли методом С.Н.Власовой и соавт.[3].

Вирусная нагрузка и генотип вируса С определялись методом ПЦР в реальном времени Rotor Gene (Corbet Research, Australia) с использованием наборов «Рибосорб-амплифенс» (Россия). Патогенетическая терапия включала  дезинтоксикационные препараты: физиологический раствор 0,9%, раствор глюкозы 5%, реосорбилакт  в/в капельно; гепатопротекторные препараты: фосфоглив, эссенциале, нео-стронже минофаген, гепа-мерц, комплекс витаминов; желчегонные препараты.

 Результаты исследования  обработаны при помощи пакета программ Statistica 6.0 Microsoft и применением t-критерия Стъюдента.

Полученные результаты и обсуждения. Результаты исследований уровней глутатионовой антиперекисной защиты показали, что у больных ХВГС наблюдается достоверный срыв гомеостатической функции системы глутатиона. Как видно по данным, представленным в табл. 1, у обследованных больных наблюдается выраженное снижение уровня GS и GSH – практически в 2 раза, показатели GSSG  ниже таковых у здоровых лиц в 1,6 раза. Наряду со снижением уровней глутатиона у обследованных больных отмечается супрессия активности глутатионзависимых ферментов. Активность ГП снижается по отношению к показателям здоровых лиц в 1,8 раза. В такой же степени снижается и активность ГТ. Достоверные изменения по отношению к показателям здоровых лиц, но в меньшей выраженности наблюдаются и в активности ГР (табл.1).

Таблица 1.

Показатели антиоксидантной системы  в группах больных ХВГС, n=83

Биохимические показатели	Здоровые, n=20	Общая группа больных, n=83
GS, мкмоль/мл.эр.	45,3 ± 2,12	23,7±0,45*
GSH, мкмоль/мл.эр.	43,2±2,14	22,2±0,45*
GSSG, мкмоль/мл.эр.	2,15±0,15	1,51±0,04*
ГР, мкмоль/НАДФН/мин/Hb	2,84±0,13	2,14±0,04*
ГП, мкмоль/GSSG/мин/Hb	583,5±28,28	332,3±6,17*
ГТ, мкмоль/ GSH/мин/Hb	2,44±0,11	1,35±0,03*

Примечание: * — наличие достоверности различий от показателей здоровых лиц

Результаты проведенных исследований обусловили наш интерес к вопросу наличия уровней супрессии глутатионовой антиоксидантной защиты. Анализ  полученных данных показывает, что из трех глутатионзависимых ферментов – ГР, ГП, ГТ, наиболее последователен в своей взаимосвязи с выраженностью клинических симптомов интоксикации – ведущим клиническим синдромом в группе обследованных больных,  является фермент ГП. По степени снижения активности ГП условно выделено  3 степени глутатионовой недостаточности: компенсированная – снижение до 30%  от контрольных показателей, субкомпенсированная – снижение от 30 до 50% и декомпенсированная – снижение показателей ГП свыше 50% от контроля.

Учитывая выявленное снижение активности глутатионовой системы для коррекции нарушений в системе глутатиона нами использован «Глутион» — препарат фирмы «Welfarm» производство Испания, содержащий в своем составе GSH.  Неоднородность больных по степени глутатионовой недостаточности позволила нам разделить больных на 3 группы: с компенсированной степенью глутатионовой недостаточности (I группа), с субкомпенсированной  (II группа) и с декомпенсированной (III группа) степенью глутатионовой недостаточности. В каждой из групп  нами был применен препарат Глутион® в дозе 600 мг на физиологическом растворе в/в капельно в течение 10 дней на фоне дезинтоксикационной и симптоматической терапии.

На фоне проводимой терапии препаратом Глутион® отмечено достоверное (p<0,05) повышение показателей GS и GSH по отношению как к показателями до начала лечения, так и к показателями после проведенной базисной терапии (табл. 2). Необходимо отметить, что у больных I группы — компенсированная степень глутатионовой недостаточности, к концу курса лечения препаратом Глутион® уровень ГП достоверно (p<0,05) повышался и при этом  отличался от показателей больных, получивших базовую терапию. Уровень ГР у больных I группы сохранялся на достаточно высоких показателях независимо от проводимой терапии. При анализе таковых показателей у больных  с субкомпенсированной и декомпенсированной глутатионовой недостаточностью (II  и III группа больных) выявлено повышение GS, GSH, ГР, ГП как у больных с субкомпесированной, так и с декомпенсированной  глутатионовой недостаточностью, но достоверности отличий от показателей до начала лечения не отмечается. Полученные результаты позволили нам сделать вывод о возможности достижении удовлетворительной коррекции равновесия ПОЛ/АОС препаратом Глутион® 600 мг только в группе больных с компенсированной степенью глутатионовой недостаточности.

         Таблица 2.

Эффективность 10 дневного курса лечения препаратом Глутион®  (600 мг в сутки) в группах больных ХВГС с различной степенью недостаточности глутатионовой системы

Биохимичес-кие показатели	Здоро-вые	Группы обследованных больных
		Стадии глутатионовой недостаточности
		I группа				II группа
		Компенсация				Субкомпенсация
		Базисная терапия		10 дневное лечение препаратом Глутион 600 мг		Базисная терапия		10 дневное лечение препаратом Глутион 600 мг
		До лече-ния n=11	После лече-ния n=11	До лече-ния n=13	После лечения n=13	До лече-ния n=12	После лече-ния n=12	До лече-ния n=13	После лечения n=13
GS, мкмоль/мл.эр.	45,3± 2,1	28,8± 2,27*	30,8± 2,43*	28,8± 2,08*	38,2± 2,83* 1 3	23,1± 1,77*	23,7± 1,82*	22,1± 1,59*	26,4± 2,12* ²
GSH, мкмоль/мл.эр.	43,2± 2,14	27± 2,2*	29,1± 2,3*	27± 1,95*	36,4± 2,69* 1 3	21,5± 1,62*	22,1± 1,7*	20,6± 1,51*	24,7± 1,99* ²
GSSG, мкмоль/мл.эр.	2,15± 0,15	1,71± 0,15	1,70± 0,15	1,73± 0,16	1,80± 0,14	1,52± 0,13*	1,6± 0,13*	1,5± 0,11*	1,7± 0,13*
ГР, мкмоль/НАДФН/мин/Hb	2,84± 0,13	3,36± 0,15	3,0± 0,13	3,2± 0,13	2,9± 0,12	2,28± 0,18*	2,09± 0,16*	2,1± 0,16*	2,11± 0,15* ²
ГП, мкмоль/GSSG/мин/Hb	583,5±28,3	441,6± 34,8*	466,1± 36,7*	437,4± 31,5*	526,3± 37,9	357,6± 27,3*	360,8± 27,6*	348,2± 25,1*	402,7± 29,0* 2 3
ГТ, мкмоль/ GSH/мин/Hb	2,44± 0,11	2,16± 0,24	2,11± 0,15	2,1± 0,16	2,1± 0,15	1,25± 0,1*	1,3± 0,12*	1,19± 0,1	1,4± 0,13*

Примечание: *-  достоверность отличий от контроля; 1 — достоверность отличий до и после лечения; 2 — достоверность отличий между группами с компенсацией и субкомпенсацией после лечения; 3 — достоверность отличий между базисной терапией  и глутионом после лечения

 

Следующим этапом наших исследований явилось повышение дозы препарата до 1200 мг в сутки у больных II (10 больных) и III (24 больных) групп глутатионовой недостаточности — субкомпенсированной и декомпенсированной. Результаты проведенных исследований показали достоверное повышение показателей активности GS, GSH и ГП у больных как во II, так и в III группах  больных по отношению к  группе больных получивших Глутиона в дозе 600 мг/сутки, что  позволило уже оценить показатели II группы больных  как  компенсированную стадию глутатионовой недостаточности, а показатели  III группы больных фактически стали соответствовать субкомпенсированной стадии глутатионовой недостаточности.

Биооксидант – глутатион и его ферментная редокс-система играют важную роль в метаболизме клеток [8, 10]. Глутатион и глутатионзависимые ферменты выполняют важную функцию в интегративной системе организма, способствуя клеточной адаптации к окислительному стрессу [10]. Известно, что в условиях патологии уровень глутатиона в значительной степени определяется изменением активности ферментных систем, регулирующих соотношение его окисленной и восстановленной форм [13]. Особый интерес в наших исследованиях представляет динамика ГР, уровень которой у больных I группы – с компенсированной глутатионовой недостаточностью, сохранялся на достаточно высоких показателях независимо от проводимой терапии, что рассматривается как положительное адаптивное напряжение этого ферментного звена, направленное на поддержания редокс потенциала клетки. Это явление, на наш взгляд, может рассматриваться как функциональная стимуляция глутатионовой системы, поддержание которой введением экзогенного глутатиона позволяет активизировать важный  фермент антирадикальной защиты – ГП [8, 7].

Таким образом, применение препарата Глутион® с учетом индивидуальных показателей степеней глутатионовой недостаточности позволяет поддержать в организме больного функциональную активность глутатионовой системы. Данный метод позволит назначать своевременную индивидуальную патогенетически ориентированную терапию, повысить экономический эффект путём сокращения сроков временной нетрудоспособности, сроков пребывания больного в стационаре. Социальная значимость предлагаемого метода лечения заключается в снижении инвалидизации больных хроническим вирусным гепатитом С.

Список использованной литературы:

1. Арипов О.А. Молекулярные механизмы клеточной гибели при гепатитах и пути их коррекции. Автореф. дис. … д-ра мед. наук. Ташкент, 2010.
2. Буеверов А.О. Оксидативный стресс и его роль в повреждении печени// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, коллопроктологии. – Москва, 2002. – №4. – С.21-25.
3. Власова С.Н., Шабунина Е.И., Переслегина И.А. Активность глутатионзависимых ферментов эритроцитов при хронических заболеваниях печени у детей. Лабораторное дело. 1990; (8): 19-22.
4. Глушков С.И. Нарушение системы глутатиона и их роль в патогенезе острых интоксикаций ксенобиотиками с различными механизмами токсического действия. Автореф. дисс. … д-ра мед. наук. СПб., 2006.
5. Даминов Т.О., Туйчиев Л.Н., Қодиров Б.А., Ходжаева М.А., Мўминова М.Т., Маматмусаев Ф.Ш. // Болаларда ўткир В ва С вирусли гепатитнинг реконвалесценция даврида гепатобилиар тизимда аниқланган ўзгаришларнинг клиник-лаборатор хусусиятлари // O’zbekiston tibbiyoti Jurnali. – 2012. — №2. – С. 6-8.
6. Ивашкин В.Т., Ющук Н.Д., Климова Е.А и др. Рекомендации по диагностике и лечению взрослых больных гепатитом С//Москва, 2014. – 75 с.
7. Кротенко Н.В., Алифирова В.М., Иванова С.А. Параметры антиоксидатной защиты при рассеянном склерозе // Журнал неврологии и психиатрии. – 2009. – №7(2). – С. 53-56.
8. Кулинский В.И., Леонова З.А., Колесниченко Л.С., Малов И.В., Данилов Ю.А. Система глутатиона в эритроцитах и плазме крови при вирусных гепатитах // Биомедицинская химия. – 2007. – Т.53. – №1. – С. 91-98.
9. Лопаткина Т.Н. Хронический гепатит С: внепеченочные проявления, особенности клинического течения, диагностика//Вирусные гепатиты: достижения и перспективы. – 2009. — №2. – С. 5-8.
10. Нагоев Б.С., Понежева Ж.Б. Некоторые аспекты иммунопатологии при хронических гепатитах//Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2009. — №6. – С. 45-49.
11. Октябрьский О.Н., Смирнова Т.В. Редокс регуляция клеточных функций // Биохимия. – 2007. — №72(2). – С. 132-145.
12. Приказ Министерство Здравоохранения Республики Узбекистан №5 от 05.01. 2012 года «О мерах по совершенствованию борьбы с вирусными гепатитами в Республике». – Т. – 2012. – 67 с.
13. Семененко Т.А. Клеточный иммунитет при гепатите С//Вирусные гепатиты. – 2000. — №1. – С. 3-9.
14. Собчак Д.М., Корочкина О.В., Соболевская О.Л. Оценка показателей медиаторов иммунного ответа у больных острым гепатитом С при комбинированной противовирусной терапии//Клиническая медицина. – 2006. — №12. – С. 47-50.
15. Таджиев Б.М., Алиев Б.Р. и др. Морфологические особенности HCV-инфекции в зависимости от генотипа вируса//IX Республиканский съезд эпидемиологов, гигиенистов, санитарных врачей и инфекционистов Узбекистана: материалы съезда (21-22 мая, Ташкент). – Ташкент, 2010. – С. 142-143.
16. Уразова О.И., Кравец Е.Б., Новицкий В.В., Рогалёва А.В., Васильева О.А., Кузнецова В.Н. и др. Активность перекисного окисления липидов и системы глутатиона в лимфоцитах крови у больных диффузным токсическим зобом // Бюллетень сибирской медицины. – 2008. — №4. – С. 47-51.
17. Чернышов В.Г. Определение восстановленного и окисленного глутатиона в эритроцитах беременных женщин. Лабораторное дело. 1983; (3): 31-33.
18. Шахгильдян И.В., Ершова О.Н., Михайлов М.И. и др. Современная характеристика острого и хронического гепатита С в России: Материалы международного симпозиума. – Брест, 2011. – С. 184–186.
19. Edeston A., Mondelli M. Lymphocyte cytotoxic to autologous hepatocytes in chronic hepatitis B virus infection//Hepatology. – 1999. – N2. – P 122-127.[schema type=»book» name=»К ВОПРОСУ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ И ИХ КОРРЕКЦИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ГЕПАТИТАХ » description=»Целью исследования явилось изучение состояния антиоксидантной системы у больных ХВГС и коррекция патогенетической терапии с учетом изменений глутатионзависимых ферментов. Материалы и методы. В работе представлены результаты обследования 83 пациентов с ХВГС в возрасте от 19 до 55 лет и 20 практически здоровых людей с отсутствием маркеров гепатитов. Состояние антиоксидантной защиты определяли по показателям активности глутатиона и глутатионзависимых ферментов: глутатионпероксидазы (ГП), глутатионредуктазы (ГР), глутатионтрансферазы (ГТ). Результаты. Результаты исследования показали, что у обследованных больных ХВГС наблюдается достоверная супрессия активности глутатионзависимых ферментов и снижение уровней общего глутатиона. Для коррекции нарушений в системе глутатиона использован препарат «Глутион» в дозах от 600 до 1200 мг в сутки в течение 10 дней. Заключение. Исследованиями установлено, что у больных ХВГС снижается активности антиоксидантной защиты. Определена целесообразность включения в комплексную патогенетическую терапию препарата «Глутион» с учетом индивидуального уровня глутатионовой недостаточности.» author=»Арипходжаева Фазилатхон Зайнитдиновна, Арипходжаева Феруза Ахборовна, Печеницына Татьяна Витальевна» publisher=»Басаранович Екатерина» pubdate=»2016-12-09″ edition=»euroasia-science.ru_#29_25.08.2016″ ebook=»yes» ]