28 Июл

РАЗРАБОТКА СПОСОБА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАЗЫ ЦВЕТЕНИЯ СЫРЬЯ ГОРЦА ПОЧЕЧУЙНОГО




Номер части:
Оглавление
Содержание
Журнал
Выходные данные


Науки и перечень статей вошедших в журнал:

Белки в любых биологических объектах являются основными материальными агентами, определяющими функционирование организма.

Исследованию белкового состава отдельных видов растений в настоящее время уделяется большое внимание. Это объясняется тем, что информация о содержании общего количества белка и, особенно, фракционного состава дает возможность решения таксономических проблем. Белки, являясь первичными продуктами экспрессии генов, отражают генетическую структуру организма, и с успехом используется в решении разнообразных задач прикладной ботаники и систематики. Белки растительной клетки обладают необходимыми для сравнительного исследования высокой гетерогенностью и вариабельностью [2].

Горец почечуйный (почечуйная трава) является фармакопейным растением и применяется в традиционной и народной медицине. Данное обстоятельство обусловлено широким спектром фармакологической активности. Препараты на основе сырья почечуйной травы обладают диуретическим, кровоостанавливающим, обезболивающим и противовоспалительным действием [3].

Выраженность фармакологического действия лекарственного растительного сырья напрямую связана с содержанием биологически активных веществ в заготовленном сырье. Количество биологически активных соединений в сырье может значительно варьировать в зависимости от стадии вегетации лекарственного растения. Оптимальной фазой для заготовки сырья горцев является стадия цветения, так как в этот период сырье содержит наибольше количество действующих фармакологически активных соединений (флавоноидов). Если лекарственное растительное сырье будет собрано на более ранней стадии вегетации (бутонизация и ранее) или более поздней (плодоношение и позже), то сырье не будет содержать необходимого количества биологически активных соединений, определяющих фармакологическую активность самого сырья и препаратов на его основе [3].

В настоящее время, в соответствии с действующей нормативной документацией на лекарственное растительное сырье горца почечуйного (Государственная Фармакопея XI издания, статья 58) должно собираться в фазу цветения [3].

Определение фазы цветения нормативно-технической документацией не предусмотрено. Имеющийся раздел «Внешние признаки» в фармакопейной статье на горец предусматривает определение и доказательство самого вида растения, нежели нужной фазы вегетации.

Целью настоящего исследования является разработка способа определения фазы цветения лекарственного растения горца почечуйного.

В исследовании использовались образцы свежезаготовленного лекарственного растительного сырья горца почечуйного, собранные на территории Самарской области в разные фазы вегетации.

Определение фракционного состава белков проводили с помощью фармакопейного метода электрофореза в 7,5% полиакриламидном геле с последующей идентификацией белковых фракций с помощью реактива амидо черный 10Б [4].

Для определения молекулярной массы белковых фракций использовали электрофоретическое разделение в  присутствии додецилсульфата натрия. Данный способ позволяет снизить до минимума влияние зарядов белков на их подвижность. Под действием натрия додецилсульфата третичная и вторичная структуры белков разрушаются, и скорость миграции белковых фракций в электрическом поле зависит только от собственных молекулярных масс белков [4].

Для построения градуировочного графика зависимости «молекулярная масса — относительная электрофоретическая подвижность (ОЭП)» при определении молекулярных масс белковых фракций  использовали белки-стандарты тропонин С (18 000 Да), тропонин I (24 000 Да), тропонин Т (38 000 Да), яичный альбумин (42 000 Да) и бычий сывороточный альбумин (68 000 Да).

В результате, на разных фазах вегетации растения было обнаружено различное количество фракций неспецифических белков (НБ), с соответствующими величинами ОЭП.

Для сырья горца почечуйного, до цветения и на стадии цветения характерно наличие по одной фракции НБ, но с разными значениями ОЭП. После цветения в горце почечуйном возможно обнаружение трех фракций НБ со специфичными значениями ОЭП и молекулярными массами (Таблица).

Таблица

Фракционный состав белков в сырье горца почечуйного в различные периоды вегетации

Название растений Фаза вегетации лекарственных растений
До цветения Цветение После цветения
ОЭП,

(M±m)

Фракции белков М, кДа ОЭП,

(M±m)

Фракции белков М, кДа ОЭП,

(M±m)

Фракции белков М, кДа
Горец почечуйный 0,75±0,02 НБ 10-15 0,78±0,02 НБ 10-15 0,10±0,01

0,50±0,01

0,73±0,02

НБ

НБ

НБ

90-95

55-60

15-20

Выводы

Таким образом, проделанная работа позволяет сделать следующие выводы:

  • В траве горца почечуйного определен фракционный состав и молекулярная масса неспецифических белков для обнаруженных фракций на разных стадиях вегетации (до цветения, на этапе цветения, после цветения);
  • Фракционный состав белков горца почечуйного имеет видовую специфичность и отличается в разные периоды физиологического развития;
  • Для установления фазы цветения собранного лекарственного растительного сырья горца почечуйного можно использовать метод электрофореза в 7,5% полиакриамидном геле.

 

Список литературы

  1. Волончук, С. К. Энергосберегающие технологии переработки растительного сырья /  С. К. Волончук, А. Н. Сапожников, Л. П. Шорникова // Ползуновский вестник. – 2011. — №2/1. – С. 166 – 171.
  2. Куркина А.В. Флавоноиды фармакопейных растений: Монография. – Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава». — 2012. — 262 с.
  3. Лекарственные растения Государственной Фармакопеи. Фармакогнозия / В.А. Ермакова; под ред. И,А. Самылиной, В.А. Северцева. – М.: АНМИ, 2003. – 534 с.
  4. Стручкова, И.В. Теоретические и практические основы проведения электрофореза белков в полиакриламидном геле: Электронное учебно-методическое пособие / И. В. Стручкова, Т. А. Кальясова. — Нижний Новгород. – 2012.
  5. Юдина, Р. С. Генетика и феногенетика малатдегидрогеназы растений / Р. С. Юдина // Вестник ВОГиС. – 2010. – Т. 14, № 2. – С. 243 – 254.
    РАЗРАБОТКА СПОСОБА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАЗЫ ЦВЕТЕНИЯ СЫРЬЯ ГОРЦА ПОЧЕЧУЙНОГО
    В данной статье приводятся данные по изучению фракционного состава неспецифических белков на разных фазах вегетации сырья растения горца почечуйного методом электрофореза в 7,5% полиакриламидном геле.
    Written by: Редкокашин Дмитрий Евгеньевич
    Published by: Басаранович Екатерина
    Date Published: 12/13/2016
    Edition: Басаранович Екатерина
    Available in: Ebook