25 Июл

Взаимосвязь экспериментального гастрита с гематологическими показателями крови




Номер части:
Оглавление
Содержание
Журнал
Выходные данные


Науки и перечень статей вошедших в журнал:

Одним из самых распространенных и социально-значимых заболеваний желудочно-кишечного тракта считается гастрит –  воспаление слизистой оболочки желудка, при котором происходит нарушение восстановления слизистой, изменяется секреция желудочного сока и нарушается его сократительная активность. Статистические данные свидетельствуют о том, что более 50% трудоспособного населения развитых стран страдает данным заболеванием, причем с возрастом заболеваемость заметно увеличивается, среди больных гастритом 80% людей страдают хронической  формой, причём атрофический гастрит наблюдается у 5% больных, которым менее 30 лет, и 50 -70% у больных достигших возраста 50 лет. Причиной возникновения гастрита в 50-70% случаев является патогенное действие бактерии Helicobacter pylori. При этом, более высокая заболеваемость отмечается среди людей, имеющих группу крови О(I). Первичные и вторичные иммунодефициты также повышают риск возникновения злокачественных новообразований в желудочно-кишечном тракте [1].

Сосудистая теория патогенеза гастрита и язвообразования, выдвинутая Р. Вирховом в 1853 г. [2], заключающаяся в нарушении кровоснабжения участка стенки желудка (тромбоз сосудов, эмболия), последующими атрофическими изменениями слизистой оболочки (ишемические повреждения), на сегодняшний день подтверждена множеством исследований, доказывающих важную роль сосудистого компонента.  Показано, что в зоне язвенного повреждения выявляются склеротические поражения терминальных артериол и их облитерация, расширение вен и капилляров расстройство микроциркуляции, помимо этого, показано увеличение частоты образования гастрита и язв у лиц с выраженным стенозом чревного ствола и со специфическими изменениями сосудов подслизистого слоя, характерными для артериальной гипертензии и сахарного диабета, ишемии, которая оказывает влияние на состояние защитного слизистого барьера.

 

Материалы и методы

Исследования проводились в Экспериментальной клинике-лаборатории биологически активных веществ ФГБНУ «ВНИИП им В.М. Горбатова». Эксперименты выполнены на крысах линии Wistar (n=30) с исходной массой 220±10 г, которые были разделены на 2 группы – опыт и интакт. Животных содержали в стандартных условиях вивария при одинаковом уходе и питании, световом и температурном режиме, со свободным доступом к воде. Для моделирования гастрита у лабораторных животных опытной группы применяли классическую модель аспиринового повреждения слизистой оболочки желудка (СОЖ): на протяжении 7 суток животным ежедневно внутрижелудочно вводили ацетилсалициловую кислоту (из расчета 300 мг/100 г массы). После развития заболевания животных содержали в обычных условиях вивария на протяжении 14 суток. По окончании эксперимента проводили макроскопическое патологоанатомическое исследование, отбирали кровь и образцы дна желудка для гистологического исследования. Гистологические срезы желудков животных приготавливали с использованием вакуумного инфильтрационного процессора Tissue-Tek VIP 5 Jr и ротационного микротома  Rotary microtome HM (толщина срезов 6-8 мкм) и оценивали в соответствии с системой OLGA-2008.

Общее клиническое исследование цельной крови животных проводили на полностью автоматическом ветеринарном гематологическом анализаторе Abacusjuniorvet 2.7 (DiatronMesstechnikGmbH, Австрия), определяли 18 показателей: лейкоциты, лимфоциты, содержание смеси моноцитов, эозинофилов, базофилов и незрелых клеток, гранулоциты, лимфоциты, миелоциты, относительное  содержание гранулоцитов, эритроциты, гемоглобин, гематокрит, средний объем эритроцита, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, ширина распределения эритроцитов, тромбоциты, тромбокрит, средний объем тромбоцита, распределение тромбоцитов.

Все манипуляции с животными осуществлялись в соответствии с Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей, требованиями приказа МЗ РФ №267 от 19.06.2003г. «об утверждении правил лабораторной практики», требованиями приказа МЗ СССР № 742 от 13.11.84 г. «об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и № 48 от 23.01.85г «о контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных», международными правилами гуманного обращения с животными.

 

Результаты исследований

Результаты патологоанатомического исследования по окончании эксперимента показали, что у крыс опытной группы отмечалось острое вздутие желудка и кишечника, содержимое кашицеобразное от желто-белого до охрянно-коричневого цвета, в 20% случаях обнаруживались сгустки крови, слизистая оболочка желудка отечная, сглаженная, гиперемированная. На слизистой оболочке желудка наблюдались различного рода эрозии и геморрагии: в 100 % случаях обнаруживались точечные кровоизлияния, преимущественно в пилорическом отделе, в 80 – 60 % случаях наблюдались эрозии, сохранялись язвенные дефекты.

Гистологические исследования показали, что у животных с аспириновым гастритом выявлены признаки, характерные для хронического гастрита различной степени. Первая степень гастрита отмечалась у 30% животных, в 20% случаев выявлялось восстановление поверхностного эпителия, при этом выявлены признаки поражения желудочных желез, как тела, так и базальных отделов. Вторая степень ХГ отмечалась у 50% лабораторных животных. Атрофический гастрит в фазе обострения, с атрофическими изменениями слизистой оболочки желудка, наблюдался у 8% крыс, при этом, ХГ III степени с сильным поражением собственной пластинки отмечался у 6% животных, ХГ IV степени с избытком слизи, явно выраженным поражением собственной пластинки отмечался у 2% животных (рис 1).

При анализе гематологических показателей крови опытных животных с моделью гастрита, выявлено выраженное увеличение количества лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов, гранулоцитов. При этом, у 35% опытных животных наблюдался выраженный лимфоцитоз, у такой же доли животных, напротив, отмечалась лимфопения; у 20% отмечался гранулоцитоз, у 33% животных, напротив, отмечался выраженный агранулоцитоз. Кроме того, у 27% животных данной группы отмечался выраженный лейкоцитоз. Содержание эритроцитов, гемоглобина в эритроцитах, тромбоцитов отличалось низким уровнем, по сравнению с показателями интактных животных (Табл.1).

Табл.1 Гематологические показатели крови лабораторных животных

Параметры Норма Группа животных
Опыт Интакт
Лейкоциты, 109/л 6,68-10,63 11,3±1,5 8,8±2,2
Лимфоциты, 109/л 5,69-8,5 8,8±0,9 6,7±0,4
Содержание смеси моноцитов, эозинофилов, базофилов и незрелых клеток, 109/л 0,04-0,13 0,16±0,01 0,06±0,01
Гранулоциты, 109/л 1,35-4,51 2,81±0,9 2,5±0,7
Лимфоциты, % 77,8-80,4 81,1±7,4 77,2±3,9
Моноциты, % 0,56-1,0 1,6±0,1 0,68±0,17
Относительное содержание гранулоцитов, % 19,1-21,6 15,1±4,4 19,7±2,8
Эритроциты, 1012/л 6,47-8,83 7,0±0,5 7,7±0,4
Гемоглобин, г/л 139-150 143,7±8,5 146,9±4,1
Гематокрит, % 39,09-45,27 39,5±1,2 37,9±1,4
Средний объем эритроцита, мкм3 49-56 50,2±3,7 51,5±1,9
Среднее содержание гемоглобина в эритроците, пг 16,9-19,6 18,6±0,6 19,1±1,3
Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, г/л 333-355 371,7±6,2 353,2±2,4
Ширина распределения эритроцитов, % 15,0-18,5 15,7±0,9 16,4±0,7
Тромбоциты, 109/л 677-915 737,9±46,9 825,4±43,4
Тромбокрит, % 0,51-0,71 0,47±0,05 0,59±0,07
Средний объем тромбоцита, мкм3 6,5-7,4 6,5±0,4 6,6±0,3
Распределение тромбоцитов  32,2-34,5 32,3±1,1 32,8±0,4

Повышение лейкоцитов и моноцитов в крови у 27% животных, увеличение содержания в крови всех видов гранулоцитов: базофильных, нейтрофильных, эозинофильных, свидетельствует о развитии воспалительного процесса, при этом, увеличение количества лимфоцитов у 35% животных, говорит о наличии адекватного иммунного ответа на развитие воспаления [3]. Возникновение у такой же доли животных лимфопении связано с миграцией лимфоцитов к очагу воспаления (язвенным образованиям). Возникающий у 33% животных выраженный имунный (гаптеновый) агранулоцитоз, связан с едедневным приемом ацетилсалициловой кислоты.

Стоит отметить, что выявленное уменьшение среднего объема эритроцита и снижение концентрации гемоглобина на фоне увеличения средней концентрации гемоглобина в эритроцитах указывает на анемию, нарушение синтеза гемоглобина и микроцитозу. Тромбоцитопения, связанная со снижением образования тромбоцитов, показывает наличие интоксикации ацетилсалициловой кислотой, уменьшение среднего объема – снижение синтеза тромбоцитов [3].

Данные изменения выявлены в крови животных, у которых в соответствии с системой ОLGA-2008, выявлена II-IV степень хронического гастрита. У животных с I степенью наблюдалась неосложненная форма ХГ, без обширных язвенных поражений, о чем свидетельствует значительное повышение количества лейкоцитов на фоне снижения лимфоцитов к показателям интактных животных[3].

Таким образом, сопоставление результатов общего исследования крови и данными гистологических исследований срезов желудков, позволило выявить основные сдвиги гематологических показателей. Так, при гастрите первой степени в крови увеличивается количество лейкоцитов и снижается содержание лимфоцитов; при дальнейшем развитии гастрита (от второй до четвертой степени) наблюдается увеличение содержания в крови всех видов гранулоцитов: базофильных, нейтрофильных, эозинофильных, что свидетельствует о дальнейшем аутохронном язвообразовании; уменьшение среднего объема эритроцита и снижение концентрации гемоглобина на фоне увеличения средней концентрации гемоглобина в эритроцитах; снижение синтеза тромбоцитов.

Список литературы:

1.Маколкин В.И., Внутренние болезни: учебник – 6-е изд., перераб. И доп./В.И. Маколкин, С.И.Овчаренко, В.А. Сулимов. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012

2.Малис Ю.Г. Рудольф Вирхов. Его жизнь, научная и общественная деятельность/ С-Пб.: Типография Высочайше утвержд. товарищества «Общественная польза», 1899 г. — 80 с.

3.Назаренко Г.И. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований./ Г.И. Назаренко, А.А. Кишкун– М.: Медицина, 2000. — 544 с.

Взаимосвязь экспериментального гастрита с гематологическими показателями крови
В статье представлены результаты исследований, в рамках которого определены и оценены стадии развития хронического гастрита посредством сопоставления гематологических показателей крови с результатами гистологических исследований желудков лабораторных животных с моделью гастрита.
Written by: Федулова Лилия Вячеславовна, Сорокина Анастасия Алексеевна
Published by: БАСАРАНОВИЧ ЕКАТЕРИНА
Date Published: 02/23/2017
Edition: ЕВРАЗИЙСКИЙ СОЮЗ УЧЕНЫХ_25.07.15_07(16)
Available in: Ebook